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天一生水muse

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问大家制备好的大鼠肝微粒体是什么颜色的?

求助:请问大家制备好的大鼠肝微粒体是什么颜色的?
      我的组织匀浆液(每克肝组织加上4倍的匀浆缓冲液)接近肉色(淡白色),超速离心后(10500g,70min)后,得到的上清也是有点红的颜色,弃上清,沉淀(肝微粒体,得到的颜色比较深,有点接近深红)用缓冲液继续悬浮,10500g,45min,弃去多余的上清液,用0.25M蔗糖溶液(接近6g肝组织加1.5mL蔗糖溶液),悬浮,-80°C保存。我得到的肝微粒体颜色比较深红的。是因为蛋白浓度偏高,所以颜色比较深吗?

[ Last edited by 天一生水muse on 2013-6-26 at 11:42 ]
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zhr0114

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+1, 3u 2013-07-01 16:46:32
你确定是先取的沉淀吗,我记得先高速离心取上清,然后再超速离心?确定是10500G,这只是高速离心啊,应该达不到超速离心的要求啊?
2楼2013-06-26 21:07:15
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天一生水muse

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhr0114 at 2013-06-26 21:07:15
你确定是先取的沉淀吗,我记得先高速离心取上清,然后再超速离心?确定是10500G,这只是高速离心啊,应该达不到超速离心的要求啊?

是的,我是高速离心后取上清,然后再把上清超速离心(105000g),弃上清,沉淀加缓冲液悬浮,再超速离心,弃去上清液,得到的沉淀加蔗糖悬浮。
3楼2013-07-01 10:48:15
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zhr0114

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
PSA: 金币+1, 3u 2013-07-01 16:46:48
我得到的微粒体是棕色里面有点红色,主要还是棕色
4楼2013-07-01 13:03:53
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天一生水muse

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhr0114 at 2013-07-01 13:03:53
我得到的微粒体是棕色里面有点红色,主要还是棕色

也是有点红棕色的,用BCA测了蛋白浓度,有几个是浓度比较大的。需要稀释。
5楼2013-07-01 16:22:25
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晨霭微凉

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 天一生水muse at 2013-07-01 16:22:25
也是有点红棕色的,用BCA测了蛋白浓度,有几个是浓度比较大的。需要稀释。...

请问你制肝微粒体用了几只老鼠做的?
6楼2015-03-04 17:05:34
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