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天一生水muse

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问大家制备好的大鼠肝微粒体是什么颜色的？

求助：请问大家制备好的大鼠肝微粒体是什么颜色的？
      我的组织匀浆液（每克肝组织加上4倍的匀浆缓冲液）接近肉色（淡白色），超速离心后（10500g，70min）后，得到的上清也是有点红的颜色，弃上清，沉淀（肝微粒体，得到的颜色比较深，有点接近深红）用缓冲液继续悬浮，10500g，45min，弃去多余的上清液，用0.25M蔗糖溶液（接近6g肝组织加1.5mL蔗糖溶液），悬浮，-80°C保存。我得到的肝微粒体颜色比较深红的。是因为蛋白浓度偏高，所以颜色比较深吗？

[ Last edited by 天一生水muse on 2013-6-26 at 11:42 ]
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1楼 2013-06-26 11:14:29
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zhr0114

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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PSA: 金币+1, 3u 2013-07-01 16:46:32
你确定是先取的沉淀吗，我记得先高速离心取上清，然后再超速离心？确定是10500G，这只是高速离心啊，应该达不到超速离心的要求啊？
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2楼2013-06-26 21:07:15
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天一生水muse

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhr0114 at 2013-06-26 21:07:15
你确定是先取的沉淀吗，我记得先高速离心取上清，然后再超速离心？确定是10500G，这只是高速离心啊，应该达不到超速离心的要求啊？

是的，我是高速离心后取上清，然后再把上清超速离心（105000g），弃上清，沉淀加缓冲液悬浮，再超速离心，弃去上清液，得到的沉淀加蔗糖悬浮。
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3楼2013-07-01 10:48:15
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zhr0114

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
PSA: 金币+1, 3u 2013-07-01 16:46:48
我得到的微粒体是棕色里面有点红色，主要还是棕色
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4楼2013-07-01 13:03:53
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天一生水muse

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhr0114 at 2013-07-01 13:03:53
我得到的微粒体是棕色里面有点红色，主要还是棕色

也是有点红棕色的，用BCA测了蛋白浓度，有几个是浓度比较大的。需要稀释。
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5楼2013-07-01 16:22:25
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晨霭微凉

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 天一生水muse at 2013-07-01 16:22:25
也是有点红棕色的，用BCA测了蛋白浓度，有几个是浓度比较大的。需要稀释。...

请问你制肝微粒体用了几只老鼠做的？
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6楼2015-03-04 17:05:34
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