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易翔仪冲

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2448930
注册: 2013-05-05
专业: 生物大分子结构与功能

[交流] pGL3-Promoter 插入位点已有2人参与

目的片段可以不插到灰色的区域而是插到HindIII（245）和NcoI （278）之间吗？

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本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
附件 1 : pGL3.doc

2013-06-26 10:52:51, 116 K

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1楼2013-06-26 10:55:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yhbletter

铜虫 (小有名气)

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虫号: 1991767
注册: 2012-09-11
专业: 生物化学

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-27 16:06:21

答案是：基本是不可以的，引物你插入的位点是启动子的后面，如果你插入的片段有ATG起始密码子，那么，你的质粒转入细胞时会从你插入的片段中ATG开始转录并翻译蛋白，如果读框没错的话，相当于你插入的片段和LUC融合蛋白（插入的读框没有终止密码子情况下），如果读框错误，那么转录后翻译的蛋白会导致LUC读框错误，最终导致你翻译的蛋白什么都不是。
不知道你想插入到哪里的目的是？