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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 怎样杀死细菌且保留抗原
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永远的202

木虫 (著名写手)

[求助] 怎样杀死细菌且保留抗原

帮朋友请教一下大家，多谢

对于E.coli O157:H7
1. 这个菌种安全性怎样？在一般开放的实验室可以做吗，实验室只有超净工作台之类的，没有独立出来。
2. 如果要把细菌杀死，不破坏其抗原，简单易行的方法是什么？
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努力做实验，减肥
1楼 2013-06-24 19:23:10
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhangxingc: 金币+2, 鼓励应助，欢迎常到微生物版 2013-06-25 09:06:07
永远的202: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-06-25 11:24:02
永远的202: 金币+1, ★有帮助 2013-06-25 11:25:12
对于E.coli O157:H7
1. 这个菌种安全性怎样？在一般开放的实验室可以做吗，实验室只有超净工作台之类的，没有独立出来。
2. 如果要把细菌杀死，不破坏其抗原，简单易行的方法是什么？

第一问，我不清楚，最好楼主自己查查文献。
第二问很好答，抗原一般是蛋白质，很多时候是细菌的膜蛋白质，你把细菌粉碎就是了，在安全条件下，然后提取出抗原蛋白质就行了。提取方法就实现粗分离-----收集细胞，粉碎细胞，分级离心亚细胞结构和生物大分子，有机沉淀或者盐析蛋白质，膜分离（超滤，微滤，过滤等）；之后细分离-----离子交换，分子筛层析，疏水层析，亲和层析等，关键是要知道具体的抗原是什么东西。
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2楼2013-06-24 23:53:30
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wzwhq

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远的202: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-06-25 11:24:36
1、大肠杆菌o157貌似能引起人的菌血症，你最好注意一下。2、用甲醛灭活可以杀细菌保抗原，灭活疫苗不都是这样做的嘛
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3楼2013-06-25 09:36:31
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xj0311

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远的202: 金币+2, ★有帮助 2013-06-25 11:24:51
o157  必须在生物安全柜里做，对人有致病性
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4楼2013-06-25 10:16:08
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白色毛衣

银虫 (小有名气)
最好在超净台内操作，将菌株培养过后，离心，洗上一两次，再重悬，甲醛灭活，置于在37℃温箱内，隔半小时或一小时摇一下，注意防止沉淀，摇个七八次差不多就差不多了，一般放四度保存一下，但时间一般不要太长，这一般是灭活苗的制法
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永远的202
资源共享
5楼2013-06-25 21:28:57
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永远的202

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 白色毛衣 at 2013-06-25 21:28:57
最好在超净台内操作，将菌株培养过后，离心，洗上一两次，再重悬，甲醛灭活，置于在37℃温箱内，隔半小时或一小时摇一下，注意防止沉淀，摇个七八次差不多就差不多了，一般放四度保存一下，但时间一般不要太长，这一 ...

多谢
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努力做实验，减肥
6楼2013-06-26 14:30:20
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y_c_x

新虫 (初入文坛)
1.E.coli O157:H7为致病性大肠杆菌，必须在超净台内操作。
2.细菌抗原多用液体或固体培养物经集菌后处理。H抗原用有动力的菌株，菌液用0.3％～0.5％甲醛处理，而O抗原则需要100℃加温2～2.5h后应用。Vi抗原则应在杀菌后再加0.5％～1％氯化钙溶液。
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7楼2013-06-26 16:40:08
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可儿不苦

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 白色毛衣 at 2013-06-25 21:28:57
最好在超净台内操作，将菌株培养过后，离心，洗上一两次，再重悬，甲醛灭活，置于在37℃温箱内，隔半小时或一小时摇一下，注意防止沉淀，摇个七八次差不多就差不多了，一般放四度保存一下，但时间一般不要太长，这一 ...

请问甲醛和菌液的体积比例有要求吗？我一直放在37度摇着灭活6小时可以吗？灭活后的菌液4度可保存多久？三四个小时再用行吗？多谢！
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幸福那一个美梦，是二人同行才有。
8楼2014-11-18 10:54:40
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