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永远的202

木虫 (著名写手)

[求助] 怎样杀死细菌且保留抗原

帮朋友请教一下大家,多谢

对于E.coli O157:H7
1. 这个菌种安全性怎样?在一般开放的实验室可以做吗,实验室只有超净工作台之类的,没有独立出来。
2. 如果要把细菌杀死,不破坏其抗原,简单易行的方法是什么?
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努力做实验,减肥
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangxingc: 金币+2, 鼓励应助,欢迎常到微生物版 2013-06-25 09:06:07
永远的202: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-06-25 11:24:02
永远的202: 金币+1, 有帮助 2013-06-25 11:25:12
对于E.coli O157:H7
1. 这个菌种安全性怎样?在一般开放的实验室可以做吗,实验室只有超净工作台之类的,没有独立出来。
2. 如果要把细菌杀死,不破坏其抗原,简单易行的方法是什么?

第一问,我不清楚,最好楼主自己查查文献。
第二问很好答,抗原一般是蛋白质,很多时候是细菌的膜蛋白质,你把细菌粉碎就是了,在安全条件下,然后提取出抗原蛋白质就行了。提取方法就实现粗分离-----收集细胞,粉碎细胞,分级离心亚细胞结构和生物大分子,有机沉淀或者盐析蛋白质,膜分离(超滤,微滤,过滤等);之后细分离-----离子交换,分子筛层析,疏水层析,亲和层析等,关键是要知道具体的抗原是什么东西。
2楼2013-06-24 23:53:30
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wzwhq

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远的202: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-06-25 11:24:36
1、大肠杆菌o157貌似能引起人的菌血症,你最好注意一下。2、用甲醛灭活可以杀细菌保抗原,灭活疫苗不都是这样做的嘛
3楼2013-06-25 09:36:31
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xj0311

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远的202: 金币+2, 有帮助 2013-06-25 11:24:51
o157  必须在生物安全柜里做,对人有致病性
4楼2013-06-25 10:16:08
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白色毛衣

银虫 (小有名气)

最好在超净台内操作,将菌株培养过后,离心,洗上一两次,再重悬,甲醛灭活,置于在37℃温箱内,隔半小时或一小时摇一下,注意防止沉淀,摇个七八次差不多就差不多了,一般放四度保存一下,但时间一般不要太长,这一般是灭活苗的制法

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5楼2013-06-25 21:28:57
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永远的202

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 白色毛衣 at 2013-06-25 21:28:57
最好在超净台内操作,将菌株培养过后,离心,洗上一两次,再重悬,甲醛灭活,置于在37℃温箱内,隔半小时或一小时摇一下,注意防止沉淀,摇个七八次差不多就差不多了,一般放四度保存一下,但时间一般不要太长,这一 ...

多谢
努力做实验,减肥
6楼2013-06-26 14:30:20
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y_c_x

新虫 (初入文坛)

1.E.coli O157:H7为致病性大肠杆菌,必须在超净台内操作。
2.细菌抗原多用液体或固体培养物经集菌后处理。H抗原用有动力的菌株,菌液用0.3%~0.5%甲醛处理,而O抗原则需要100℃加温2~2.5h后应用。Vi抗原则应在杀菌后再加0.5%~1%氯化钙溶液。
7楼2013-06-26 16:40:08
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可儿不苦

金虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 白色毛衣 at 2013-06-25 21:28:57
最好在超净台内操作,将菌株培养过后,离心,洗上一两次,再重悬,甲醛灭活,置于在37℃温箱内,隔半小时或一小时摇一下,注意防止沉淀,摇个七八次差不多就差不多了,一般放四度保存一下,但时间一般不要太长,这一 ...

请问甲醛和菌液的体积比例有要求吗?我一直放在37度摇着灭活6小时可以吗?灭活后的菌液4度可保存多久?三四个小时再用行吗?多谢!
幸福那一个美梦,是二人同行才有。
8楼2014-11-18 10:54:40
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