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iwolfman

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
阿凡的小开: 金币+10, 翻译EPI+1, ★★★很有帮助, 还行吧,谢谢 2013-07-18 17:52:05
(1)低分辨率
原因:床未填充好
推荐改变:检测效率,充填(如需)。
总是检测新柱的效率,尤其是在实验室填充的柱,在重要应用使用前要检测。
原因:床被脂类、变质蛋白质等污染。
推荐改变:清理柱如推荐所示。
如果柱中用了非常粗(纯度低)的样品,那么被污染的风险就会很高。柱或凝胶介质的说明中通常给出

了清理柱的介绍协议。

(2)低产率
原因:床被脂类或变形蛋白等污染。
推荐改变:清理柱如推荐所示。
提示:柱使不使用时,缓慢的进(通入/运行)洗涤液来组织微生物生长。如果柱要隔好多天才用,要

把它洗净点,保存在冰箱或冷室内。
原因:碳水化合物(糖蛋白)导致的离子聚合物和复合物。
推荐变化:想缓冲液中注入150mM的氯化钠或高达10%的三甲铵乙内酯。
原因:通过SH-群结合的复合物
推荐变化:增加还原剂(DTT等)到缓冲液中。
原因:疏水性聚合物
推荐变化:增加10%到20%乙醇或其他有机溶剂到缓冲器中。
原因:微胶粒或蛋白聚合物的凝胶过滤。
推荐变化:降低缓冲液中清洁剂浓度,直到低于CMC或使用不同清洁剂(扔停留低于它的CMC)。在使用特定添加剂来增加溶液化前,记得检查缓冲溶液中的样品和你的柱在缓冲器前稳定性。
原因:蛋白酶消化
推荐变化:向缓冲液中增加蛋白酶抑制剂。
原因:疏水性吸附
推荐改变:在高例子强度缓冲器中,增加10%-20%乙醇或其他有机溶剂到缓冲器中,或减少盐浓度。
原因:基体上(羧基-,硫酸盐-)的负电荷群和样品分子上的正电荷导致的离子吸附。
推荐改变:向缓冲液中加入150mM氯化钠或其他盐。
提示:确定你的样品在使用前在缓冲液添加剂中是稳定的。一些推荐的添加剂可能会变性或使一个蛋白质失活。
提示:确定你的柱和系统在使用前在缓冲液添加剂中是稳定的。

金币太少
2楼2013-06-24 14:54:16
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