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iwolfman

铁虫 (正式写手)

翻译EPI: 4
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
阿凡的小开: 金币+10, 翻译EPI+1, ★★★很有帮助, 还行吧，谢谢 2013-07-18 17:52:05

（1）低分辨率
原因：床未填充好
推荐改变：检测效率，充填（如需）。
总是检测新柱的效率，尤其是在实验室填充的柱，在重要应用使用前要检测。
原因：床被脂类、变质蛋白质等污染。
推荐改变：清理柱如推荐所示。
如果柱中用了非常粗（纯度低）的样品，那么被污染的风险就会很高。柱或凝胶介质的说明中通常给出

了清理柱的介绍协议。

（2）低产率
原因：床被脂类或变形蛋白等污染。
推荐改变：清理柱如推荐所示。
提示：柱使不使用时，缓慢的进（通入/运行）洗涤液来组织微生物生长。如果柱要隔好多天才用，要

把它洗净点，保存在冰箱或冷室内。
原因：碳水化合物（糖蛋白）导致的离子聚合物和复合物。
推荐变化：想缓冲液中注入150mM的氯化钠或高达10%的三甲铵乙内酯。
原因：通过SH-群结合的复合物
推荐变化：增加还原剂（DTT等）到缓冲液中。
原因：疏水性聚合物
推荐变化：增加10%到20%乙醇或其他有机溶剂到缓冲器中。
原因：微胶粒或蛋白聚合物的凝胶过滤。
推荐变化：降低缓冲液中清洁剂浓度，直到低于CMC或使用不同清洁剂（扔停留低于它的CMC）。在使用特定添加剂来增加溶液化前，记得检查缓冲溶液中的样品和你的柱在缓冲器前稳定性。
原因：蛋白酶消化
推荐变化：向缓冲液中增加蛋白酶抑制剂。
原因：疏水性吸附
推荐改变：在高例子强度缓冲器中，增加10%-20%乙醇或其他有机溶剂到缓冲器中，或减少盐浓度。
原因：基体上（羧基-，硫酸盐-）的负电荷群和样品分子上的正电荷导致的离子吸附。
推荐改变：向缓冲液中加入150mM氯化钠或其他盐。
提示：确定你的样品在使用前在缓冲液添加剂中是稳定的。一些推荐的添加剂可能会变性或使一个蛋白质失活。
提示：确定你的柱和系统在使用前在缓冲液添加剂中是稳定的。

金币太少

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2楼2013-06-24 14:54:16

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