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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 样品几乎不溶于水，怎么做体外抗肿瘤啊
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vvsober

木虫 (小有名气)

[求助] 样品几乎不溶于水，怎么做体外抗肿瘤啊

我的样品是糖脂类，在有机溶剂里溶解度好，在水里几乎不溶，欲用MTT法测其体外抗肿瘤活性，要怎么将样品溶到培养基里？之前试过DMSO，可以溶样品，可是加到培养基里以后又变成了絮状物，溶解不了。。是我用的DMSO太少了么？怕用多了对细胞有毒性啊。。求指点。谢谢。
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选择出色
1楼 2013-06-23 13:22:40
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
vvsober: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-24 14:43:48
DMSO 的含量应该是0.1%以下没有问题。我觉得你的药物应该先搞清楚抗肿瘤的机制，是现有的药物还是新发现的？我猜应该是新发现的，个人感觉你可以尝试直接制备成胶体药物进行细胞实验，或者化学手段改善溶解性后再试。因为我觉得如果一个药物，抗肿瘤作用是在细胞水平的机制的话，首先应该可以透过细胞膜，这么低的溶解性，logP 值不合适，难以透过细胞膜，怎么考察抗肿瘤的作用呢？
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5楼2013-06-24 13:57:55
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langshi1712

木虫 (正式写手)
★ ★
xiaoxiao270: 金币+2 2013-06-23 19:29:24
你好，这个问题我以前遇到过。我的解决方法是，先将样品溶解到DMSO中，然后在取少量DMSO样品混合液，慢慢加到培养基中，加完后，用移液枪吹打几次，分散均匀即可。在这个过程中，要注意两点，一是用DMSO溶解样品的时候，尽可能得降低样品在DMSO中的浓度（因为DMSO越多，加到培养液中，样品析出的可能性越小，一般DMSO的浓度控制在0.1%或者更小，并以此浓度做空白对照，对细胞损伤不大）。二是加的时候，要把DMSO-样品混合液慢慢加到培养基中，不要加反，也不要加的过快。
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2楼2013-06-23 19:23:28
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langshi1712

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
vvsober: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-24 14:44:00
你好，这个问题我以前遇到过。我的解决方法是，先将样品溶解到DMSO中，然后在取少量DMSO样品混合液，慢慢加到培养基中，加完后，用移液枪吹打几次，分散均匀即可。在这个过程中，要注意两点，一是用DMSO溶解样品的时候，尽可能得降低样品在DMSO中的浓度（因为DMSO越多，加到培养液中，样品析出的可能性越小，一般DMSO的浓度控制在0.1%或者更小，并以此浓度做空白对照，对细胞损伤不大）。二是加的时候，要把DMSO-样品混合液慢慢加到培养基中，不要加反，也不要加的过快。
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3楼2013-06-23 19:23:50
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gslzzhixin

铁杆木虫 (正式写手)
我也遇到了这样的难题，学习了。可以试试楼上的办法，谢谢。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-06-23 23:29:40
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