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vvsober

木虫 (小有名气)

[求助] 样品几乎不溶于水,怎么做体外抗肿瘤啊

我的样品是糖脂类,在有机溶剂里溶解度好,在水里几乎不溶,欲用MTT法测其体外抗肿瘤活性,要怎么将样品溶到培养基里?之前试过DMSO,可以溶样品,可是加到培养基里以后又变成了絮状物,溶解不了。。是我用的DMSO太少了么?怕用多了对细胞有毒性啊。。求指点。谢谢。
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langshi1712

木虫 (正式写手)

★ ★
xiaoxiao270: 金币+2 2013-06-23 19:29:24
你好,这个问题我以前遇到过。我的解决方法是,先将样品溶解到DMSO中,然后在取少量DMSO样品混合液,慢慢加到培养基中,加完后,用移液枪吹打几次,分散均匀即可。在这个过程中,要注意两点,一是用DMSO溶解样品的时候,尽可能得降低样品在DMSO中的浓度(因为DMSO越多,加到培养液中,样品析出的可能性越小,一般DMSO的浓度控制在0.1%或者更小,并以此浓度做空白对照,对细胞损伤不大)。二是加的时候,要把DMSO-样品混合液慢慢加到培养基中,不要加反,也不要加的过快。
2楼2013-06-23 19:23:28
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langshi1712

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vvsober: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-24 14:44:00
你好,这个问题我以前遇到过。我的解决方法是,先将样品溶解到DMSO中,然后在取少量DMSO样品混合液,慢慢加到培养基中,加完后,用移液枪吹打几次,分散均匀即可。在这个过程中,要注意两点,一是用DMSO溶解样品的时候,尽可能得降低样品在DMSO中的浓度(因为DMSO越多,加到培养液中,样品析出的可能性越小,一般DMSO的浓度控制在0.1%或者更小,并以此浓度做空白对照,对细胞损伤不大)。二是加的时候,要把DMSO-样品混合液慢慢加到培养基中,不要加反,也不要加的过快。
3楼2013-06-23 19:23:50
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gslzzhixin

铁杆木虫 (正式写手)

我也遇到了这样的难题,学习了。可以试试楼上的办法,谢谢。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-06-23 23:29:40
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vvsober: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-24 14:43:48
DMSO 的含量应该是0.1%以下没有问题。我觉得你的药物应该先搞清楚抗肿瘤的机制,是现有的药物还是新发现的?我猜应该是新发现的,个人感觉你可以尝试直接制备成胶体药物进行细胞实验,或者化学手段改善溶解性后再试。因为我觉得如果一个药物,抗肿瘤作用是在细胞水平的机制的话,首先应该可以透过细胞膜,这么低的溶解性,logP 值不合适,难以透过细胞膜,怎么考察抗肿瘤的作用呢?
5楼2013-06-24 13:57:55
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vvsober

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by langshi1712 at 2013-06-23 19:23:28
你好,这个问题我以前遇到过。我的解决方法是,先将样品溶解到DMSO中,然后在取少量DMSO样品混合液,慢慢加到培养基中,加完后,用移液枪吹打几次,分散均匀即可。在这个过程中,要注意两点,一是用DMSO溶解样品的时 ...

恩恩,我再试试看。。
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6楼2013-06-24 14:41:57
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vvsober

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by belladonae at 2013-06-24 13:57:55
DMSO 的含量应该是0.1%以下没有问题。我觉得你的药物应该先搞清楚抗肿瘤的机制,是现有的药物还是新发现的?我猜应该是新发现的,个人感觉你可以尝试直接制备成胶体药物进行细胞实验,或者化学手段改善溶解性后再试 ...

哇。。你回答的好专业啊。。我刚刚开始做抗肿瘤,做的也不深入,都不知道什么是logP值。。。。慢慢学习了要、、
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7楼2013-06-24 14:43:37
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xiaoyidao129

木虫 (著名写手)

教授

厉害了,我的虫虫们
生命不息,奋斗不止!
8楼2018-06-07 10:03:29
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