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我要我的

铜虫 (初入文坛)

[求助] Sephadex G100的进

哪位大神可知道,为什么我处理G100之后,流速会非常的慢,处理方法如下,大神帮我看看,到底是哪一步出错了。

1)         Sephadex G-100 凝胶预处理

a)              100ml烧杯,称取5克sephadex G-100,加入50ml去离子水,浸泡溶胀24小时。

b)             倾去sephadex G-100溶胀后凝胶上层的水,加入凝胶等体积的1.0 mol/L NaOH液处理,用搅棒轻轻搅动,并浸泡1小时处理后倾去。用去离子水洗涤。洗涤过程中,用倾去法除去细颗粒。其方法是用搅棒将凝胶搅匀(注意不要过分用力搅拌,以防止颗粒破碎),放置数分钟,将未沉淀的细颗粒随上层水倒掉。浮选3-5次,直至上层没有细颗粒为止,再浸泡水洗至PH中性。

c)        将Sephadex G-100凝胶水溶液盛放于抽滤瓶中,用洗耳球塞住杯口,减压抽气30分钟,除去凝胶溶液内的气泡,将脱气后的凝胶溶液轻轻倒入烧杯中,其中盛有1/2去离子水。
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努力就有收获
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ly-g450

木虫 (小有名气)

楼主,你的胶溶胀后体积能增加多少
4楼2013-06-22 11:06:21
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查看全部 7 个回答

hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+1, 鼓励发帖应助! 2013-06-21 22:17:15
我要我的: 金币+5, ★有帮助 2013-06-22 11:56:25
我们这边也遇到了相似的问题 应该是填料的问题 上次用的GE原装 没有任何问题 所谓的进口分装假货太多 今天有同学尝试 沸水浴6h后 效果好一点了 应该是颗粒溶胀开的缘故
太胖了!~
2楼2013-06-21 22:03:00
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双螺旋DNA

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我要我的: 金币+2, ★有帮助 2013-06-22 11:57:34
我要我的: 金币+3 2013-06-22 11:58:09
直接 去离子水 过夜溶胀 试试,后面的都不要
3楼2013-06-21 22:34:34
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我要我的

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ly-g450 at 2013-06-22 11:06:21
楼主,你的胶溶胀后体积能增加多少

10g差不多能容涨至300ml
努力就有收获
5楼2013-06-22 11:57:11
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