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terry_pan

铜虫 (初入文坛)

[求助] 各位做大肠杆菌发酵的朋友看过来,这到底是什么问题? 已有5人参与

事情是这样的,公司有个重组大肠杆菌表达胰岛素的项目,原本发酵都正常,但最近一个月来一直出问题,而且是同一个问题,上5L罐培养4h后OD就不上升,反倒下降,领导说可能染噬菌体,但涂板也未发现有溶菌圈,很纳闷,哪位大神告诉我下这到底是什么问题
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小小的天,有大大的梦想
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wangju87c

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得污染噬菌体会出现以下几种情况,1、溶氧值有一个快速下降又突然上升的情况,同时OD值从30,40或50以上一下子跌至个位数。2、发酵液产生大量泡沫。3、发酵液变得粘稠,把发酵液倒出来的时候,没有观察到一滴一滴的样子。4、视镜上残留有蛋白条带。
最好的办法是取发酵液打个电镜。这样是不是噬菌体就很清楚了
哥已婚
12楼2014-09-19 15:33:38
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fuding6

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
涂平板,活化一下菌种。
2楼2013-06-19 15:37:37
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terry_pan

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuding6 at 2013-06-19 15:37:37
涂平板,活化一下菌种。

平板是涂了,但没有看到溶菌圈,你说的活化下菌种到底是什么目的,因为我每次都是甘油管接新鲜平板,菌应该生长状态还是没什么问题的吧,求指教
小小的天,有大大的梦想
3楼2013-06-19 17:24:25
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fuding6

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们也出现过你说的情况,发酵12h后OD值越来越低,刚开始我们也以为是噬菌体感染,但用平板筛查,没有噬菌斑,于是我们把保存的菌种重新涂平板挑单克隆,再做发酵就正常了。或者重新转化一下。
4楼2013-06-19 23:11:44
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