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huanyi

金虫 (小有名气)

[求助] 帮我看看我的PCR那可能出了状况~

大家好~本人初次接触微生物,老师要求做个菌群分析~
用的引物是古菌的109和518,这个PCR出来为什么这么模糊,背景也很白~我到目前为止不会看图,只是与别人的比觉得不好,没有达到目标效果。。大家能不能分析下?(没有mark,四个都是模板)
帮我看看我的PCR那可能出了状况~
第一次PCR.JPG
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专注于最重要的那件事,但也不要拒绝其他的
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huanyi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-06-19 12:58:15
老实说我不太了解DGGE,所以二聚体会不会影响,我不敢说。

要是通过切胶回收纯化一下呢?肯定没有二聚体了,但是是否会对PAGE有影响就不知道了(我感觉没事)...

好的,谢谢啦~还是先试试吧,不行了再说。
专注于最重要的那件事,但也不要拒绝其他的
11楼2013-06-19 14:20:34
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 严重同意 2013-06-19 07:05:27
我觉得挺好的啊, PCR的产物比较少所以曝光时间长了点造成图片的背景较强. 不过marker下次一定要带.
2楼2013-06-18 23:23:23
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 严重同意 2013-06-19 07:05:45
有引物二聚体,可以优化下减少二聚体,同时点mark ,确认大小
3楼2013-06-18 23:43:24
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huanyi

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-06-18 23:23:23
我觉得挺好的啊, PCR的产物比较少所以曝光时间长了点造成图片的背景较强. 不过marker下次一定要带.

这样可以吗?第一次做,老师又不懂,自己的分析,与别人比较觉得条带不亮,而且背景很白。我想着下一步做DGGE,不知道行不行。
专注于最重要的那件事,但也不要拒绝其他的
4楼2013-06-19 08:39:32
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