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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » T0代转基因水稻种子照理是杂合体，为什么会性状分离，求各位大神给出解释
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hongyongbo

铜虫 (正式写手)

[求助] T0代转基因水稻种子照理是杂合体，为什么会性状分离，求各位大神给出解释

本人用转基因的方法将水稻转录因子沉默后，得到T0代转基因水稻种子，照理都是杂合体，遗传背景都是一致的，为什么会性状分离？？？
如下图，每个平板分别是单个转基因水稻株系得到的种子经50 mg/L的潮霉素B筛选，都在相同条件下发芽，发现以下3个株系有部分是白化苗，百思不得其解。

在我的理解中，T0代的种子还是杂合体没有性状分离，且同一个株系拿到的种子是插入相同的位点，如果打断了叶绿素合成的基因照理应该都是白化苗，难道一个株系内部沉默效率也是有区别的？忘各位大神给出解释
T0代转基因水稻种子照理是杂合体，为什么会性状分离，求各位大神给出解释
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T0代转基因水稻种子照理是杂合体，为什么会性状分离，求各位大神给出解释-1
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T0代转基因水稻种子照理是杂合体，为什么会性状分离，求各位大神给出解释-2
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1楼 2013-06-17 17:36:16
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hongyongbo

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-18 01:09:17
你用的是RNAi的方法，是在转录水平上控制表达，不是从基因组水平上敲除基因，所以不存在所谓的性状分离吧。要有也是RNAi抑制程度不同。我认为你所谓的白化苗，应该是被抗生素杀死的。RNAi的第一代出现无抗性的种子也 ...

我做的是转录因子基因，用的是SRDX转录抑制子的方法，得到的第一代种子是杂合体理论上每颗都有抗性，为什么不是所有的种子都有抗性，难道插入片段会随机丢失；关于抗生素抑制产生白化现象，也不是所有的苗都被抑制了，还有一个现象是部分白化苗后期会转绿，求解释，万分感谢！
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3楼2013-06-18 10:14:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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hongyongbo: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-18 10:08:37
你用的是RNAi的方法，是在转录水平上控制表达，不是从基因组水平上敲除基因，所以不存在所谓的性状分离吧。要有也是RNAi抑制程度不同。我认为你所谓的白化苗，应该是被抗生素杀死的。RNAi的第一代出现无抗性的种子也是正常的。
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2楼2013-06-18 01:09:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hongyongbo at 2013-06-18 10:14:26
我做的是转录因子基因，用的是SRDX转录抑制子的方法，得到的第一代种子是杂合体理论上每颗都有抗性，为什么不是所有的种子都有抗性，难道插入片段会随机丢失；关于抗生素抑制产生白化现象，也不是所有的苗都被抑制 ...

关于白化苗转绿的问题，可能是抗生素的浓度有点高。一般无抗性的种子不会有正常的根和真叶。
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4楼2013-06-18 11:04:53
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hongyongbo

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-18 11:04:53
关于白化苗转绿的问题，可能是抗生素的浓度有点高。一般无抗性的种子不会有正常的根和真叶。...

抗生素浓度真心不算高，人家都有用100 mg/L浓度筛的 不知还有其他方面的原因
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5楼2013-06-19 14:42:47
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