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hongyongbo

铜虫 (正式写手)

[求助] T0代转基因水稻种子照理是杂合体,为什么会性状分离,求各位大神给出解释

本人用转基因的方法将水稻转录因子沉默后,得到T0代转基因水稻种子,照理都是杂合体,遗传背景都是一致的,为什么会性状分离???
如下图,每个平板分别是单个转基因水稻株系得到的种子经50 mg/L的潮霉素B筛选,都在相同条件下发芽,发现以下3个株系有部分是白化苗,百思不得其解。

在我的理解中,T0代的种子还是杂合体没有性状分离,且同一个株系拿到的种子是插入相同的位点,如果打断了叶绿素合成的基因照理应该都是白化苗,难道一个株系内部沉默效率也是有区别的?忘各位大神给出解释
T0代转基因水稻种子照理是杂合体,为什么会性状分离,求各位大神给出解释
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T0代转基因水稻种子照理是杂合体,为什么会性状分离,求各位大神给出解释-1
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T0代转基因水稻种子照理是杂合体,为什么会性状分离,求各位大神给出解释-2
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hongyongbo: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-18 10:08:37
你用的是RNAi的方法,是在转录水平上控制表达,不是从基因组水平上敲除基因,所以不存在所谓的性状分离吧。要有也是RNAi抑制程度不同。我认为你所谓的白化苗,应该是被抗生素杀死的。RNAi的第一代出现无抗性的种子也是正常的。
2楼2013-06-18 01:09:17
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普通回帖

hongyongbo

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-18 01:09:17
你用的是RNAi的方法,是在转录水平上控制表达,不是从基因组水平上敲除基因,所以不存在所谓的性状分离吧。要有也是RNAi抑制程度不同。我认为你所谓的白化苗,应该是被抗生素杀死的。RNAi的第一代出现无抗性的种子也 ...

我做的是转录因子基因,用的是SRDX转录抑制子的方法,得到的第一代种子是杂合体理论上每颗都有抗性,为什么不是所有的种子都有抗性,难道插入片段会随机丢失;关于抗生素抑制产生白化现象,也不是所有的苗都被抑制了,还有一个现象是部分白化苗后期会转绿,求解释,万分感谢!
3楼2013-06-18 10:14:26
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hongyongbo at 2013-06-18 10:14:26
我做的是转录因子基因,用的是SRDX转录抑制子的方法,得到的第一代种子是杂合体理论上每颗都有抗性,为什么不是所有的种子都有抗性,难道插入片段会随机丢失;关于抗生素抑制产生白化现象,也不是所有的苗都被抑制 ...

关于白化苗转绿的问题,可能是抗生素的浓度有点高。一般无抗性的种子不会有正常的根和真叶。
4楼2013-06-18 11:04:53
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hongyongbo

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-18 11:04:53
关于白化苗转绿的问题,可能是抗生素的浓度有点高。一般无抗性的种子不会有正常的根和真叶。...

抗生素浓度真心不算高,人家都有用100 mg/L浓度筛的 不知还有其他方面的原因
5楼2013-06-19 14:42:47
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dxzhaomiao

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你的T0代种子是怎么定义的,照我的理解,你应该是得到转基因再生苗自交之后收获的种子吧,如果是这样的话,你的种子就属于T1代,理论上是应该有性状分离的。我以前做烟草是这样的
6楼2013-06-20 14:59:49
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dxzhaomiao

金虫 (正式写手)

不好意思搞错了……汗,你这个应该是杂合体,抱歉
7楼2013-06-20 15:02:27
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hongyongbo

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by dxzhaomiao at 2013-06-20 15:02:27
不好意思搞错了……汗,你这个应该是杂合体,抱歉

这位MM,不知你之前有没碰到过这种情况,怎么解释
8楼2013-06-20 16:25:19
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
9楼2013-07-17 19:31:57
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
10楼2013-07-17 23:25:06
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