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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 真菌线粒体DNA（mtDNA)提取纯度
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zyuan123000

铜虫 (小有名气)

[交流] 真菌线粒体DNA（mtDNA)提取纯度 已有1人参与

哪位前辈路过知道，我用的氯化铯梯度离心法，提取真菌线粒体DNA（mtDNA)。离心后，可以看到DNA分层，抽取出来后，去除氯化铯，测定纯度时，OD值总在1.4-1.7左右，总是达不到1.8-2.0.不知是和原因。希望大家帮忙指导一下。。。
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1楼 2013-06-17 11:27:17
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andywang6137

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用水稀释测OD值，数值偏低。继续往下做一做看看，说不定结果很好呢
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2楼2013-06-18 13:35:30
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zyuan123000

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by andywang6137 at 2013-06-18 13:35:30
用水稀释测OD值，数值偏低。继续往下做一做看看，说不定结果很好呢

用水和TE都试过，值都很低，琼脂糖电泳没有条带，A260在0.02-0.07左右，浓度在100-300ng/ul，感觉像是降解了，但，整个过程都在冰上操作的，引物扩增倒是有很好的条带，不知道是不是提纯那里出了问题。希望高手指点。。。
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3楼2013-06-18 15:30:04
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