24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 9826.8
散金: 14
红花: 4
帖子: 635
在线: 556.9小时
虫号: 618577
注册: 2008-10-06
专业: 神经生物学

[求助] IP结果求助

我用新鲜样品进行Co-IP实验，结果如图。其中左边两个是用与我的目的蛋白的抗体相同来源的IgG进行沉淀后上样再用目的蛋白的抗体进行western blot的结果，右边两个是用我的目的蛋白的抗体进行沉淀后上样再用目的蛋白的抗体进行western blot的结果。我的目的蛋白是42kD，IgG本身55kD，从图中都能看出来，但是用我的目的蛋白抗体进行显色，怎么会多出三条带来，求解？

PRMT1-IP.jpg

回复此楼

» 猜你喜欢

拟解决的关键科学问题还要不要写已经有8人回复
求推荐博导已经有4人回复
为什么nbs上溴没有产物点出现呢已经有5人回复
存款400万可以在学校里躺平吗已经有34人回复
求助一下有机合成大神已经有4人回复
最失望的一年已经有16人回复
求推荐英文EI期刊已经有5人回复
26申博已经有3人回复
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？已经有10人回复
疑惑？已经有5人回复

砖石王老三！！！

1楼 2013-06-17 09:48:41

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)

应助: 30 (小学生)
金币: 79.8
红花: 1
帖子: 139
在线: 143.4小时
虫号: 827947
注册: 2009-08-14
性别: GG
专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

引用回帖:

3楼: Originally posted by wchuangqi at 2013-06-17 13:52:29
我觉得是因为你IP 的样品中加的抗体多的原因。因为你可以发现你的IP样品55KD的IGG条带很强。所以会有更多的带子出来。你可以尝试将对照的抗体增多，我觉得对照也可以暴出来。

非特异条带呗。其实很多时候，western的结果并不能得到很单一的条带。因为western的灵敏度跟发光底物的灵敏性有很大关系。如果你用低灵敏度的底物，你可能得到一条单一的条带，但是当你换成高灵敏度的底物的时候或者延长曝光时间，你会发现很多非特异的条带也会出来。当然说到底可能还是因为抗体不够特异的原因。