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liu58yeying

金虫 (小有名气)

[求助] 请问怎样证实代谢产物呢

通过LC-MS,我在血浆中找到了一个化合物的代谢产物分子式,有葡醛酸化和甲基化。现在想证实这个结果,不知证实办法是怎样。貌似有这些选择:
1. 用LC-MS/MS 确认代谢物结构
2. 用去葡醛酸酶和去甲基化酶处理血浆,若血浆中相应信号消失,说明的确是葡醛酸化和甲基化。

请问大家,对于第一种选择,靠谱吗,若是用第二种选择,应该要买什么酶呢,sigma的葡糖糖醛酸酶吗?那么去甲基化酶用什么商品名呢?

或者有更好的选择吗? 请大家指教。
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liu58yeying: 金币+10 2013-06-16 15:07:39
不就是代谢组学技术,一帮采用第一条路子。尤其你知道大致结构
2楼2013-06-16 14:00:11
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liu58yeying: 金币+5 2013-06-16 19:51:33
第一个方法吧,方便一点
3楼2013-06-16 17:02:17
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liu58yeying: 金币+5 2013-06-17 11:51:18
如果你只用液质联用恐怕不一定能测定出来,再打个红外或者核磁应该可以的
4楼2013-06-17 10:15:03
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liu58yeying

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-06-17 10:15:03
如果你只用液质联用恐怕不一定能测定出来,再打个红外或者核磁应该可以的

但是这样是不是要积累较大的量并且纯化啊
5楼2013-06-17 11:51:45
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by liu58yeying at 2013-06-17 11:51:45
但是这样是不是要积累较大的量并且纯化啊...

不用的,用的量都不多的,你是只要鉴定峰型或者片段就可以了,所以不要多纯
6楼2013-06-17 11:54:58
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bigpalewolf

金虫 (正式写手)

如果你只是定性不定量的话  要看你用的是什么质谱?高分辨一般能确定分子式吧?但是确定不了葡糖醛酸的结合位点。
7楼2013-06-18 05:04:22
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liu58yeying

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-06-17 11:54:58
不用的,用的量都不多的,你是只要鉴定峰型或者片段就可以了,所以不要多纯...

请问一下,如果要做核磁或红外的量,要拿多少组织进行浸提和纯化呢,我觉得我现在得到的都是微克级别的,要做这类检测不是要做成百上千次的分离纯化才能得到相应的量?
8楼2013-06-21 09:19:47
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
8楼: Originally posted by liu58yeying at 2013-06-21 09:19:47
请问一下,如果要做核磁或红外的量,要拿多少组织进行浸提和纯化呢,我觉得我现在得到的都是微克级别的,要做这类检测不是要做成百上千次的分离纯化才能得到相应的量?...

你怎么觉得是微克呢?.........你做出来一点总要压片的吧,虽然他的检测限可以达到但是你也要有几克的量来检测才行啊
9楼2013-06-21 09:25:19
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redyna渊

铜虫 (小有名气)

微克的,液质联用必须能测出来了,既然指导分子式,就知道MW,母离子就用这个加氢,子离子你可以选择你原来的母核,做个MRM看看有没有。
10楼2013-07-02 21:40:57
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