应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 物理 » 原子、分子&光学 » 荧光偏振测定，blank孔的值很大，为什么？
41/1返回列表
查看: 2073  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xinwenwen

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光偏振测定，blank孔的值很大，为什么？

我是用Molecular Devices SpectraMax M5分光光度计测定溶液的荧光偏振强度，来分析蛋白质和荧光标记物的结合程度。
激发波长485，发射波长535
用的板子为标准96孔全黑色微孔板，读数方式是终点顶部读数。
测定时，出现的异常情况是
1. 随着蛋白浓度的提高，荧光偏振应该增大，结果却是减小，趋势很明显，正好和预期相反。
2. 测定了一下空白孔的荧光偏振值，里面什么都没加，完全是空的，其读数远高于样品的测定值，大约3倍于样品孔。
由于本人不是物理专业的，所以请教各位高手解决此问题，不胜感激。
另外还有一个疑问
文献报道都是测定的荧光各向异性（r），我此次是测定荧光偏振强度（P），因为条件所限，我们这台仪器只能测定荧光偏振强度（P），有文献报道，P和r的换算公式是
r=2*P/（3-P），不知道这样换算是否可行。
求解。。。。。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

偏振

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-14 17:56:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenglong_li

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

“测定了一下空白孔的荧光偏振值，里面什么都没加，完全是空的，其读数远高于样品的测定值，大约3倍于样品孔。”这个正常，可以测定一下空白孔的荧光强度，荧光强度不能超过5
PS 您是哪个高校的学生？
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-05 17:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shanshan1992

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenglong_li at 2013-07-05 17:25:34
“测定了一下空白孔的荧光偏振值，里面什么都没加，完全是空的，其读数远高于样品的测定值，大约3倍于样品孔。”这个正常，可以测定一下空白孔的荧光强度，荧光强度不能超过5
PS 您是哪个高校的学生？

那这样的话，样品测定值就是负值了，也没有关系吗？
赞一下 回复此楼
3楼2017-07-04 10:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhhh001

新虫 (初入文坛)
解决了吗，楼主

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2021-06-02 08:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xinwenwen 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 22:18 by xxniao123
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +10 晴天加油 2026-08-26 11/550 2026-08-27 16:35 by msuhlx
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭