应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物southern杂交
202/2返回列表上一页12
查看: 2277  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cxwu10016869

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-10 16:52:10
感觉背景有点高，转膜效率不高
赞一下 回复此楼
11楼2013-06-07 21:37:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖乐allen

金虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by dcb005 at 2013-06-07 16:13:04
隐隐约约能看到条带，感觉封闭的不好，还有洗脱，造成大量背景，有条件用p32放射性试一试

封闭不好还真有可能，这张图用的封闭液放在4度有2周了用的。今天做另外一个southern时都发臭了，配了新的。那我把这图的膜从杂交再返工一次试试看怎么样。
赞一下 回复此楼
做人简单，做事勤奋
12楼2013-06-08 11:03:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖乐allen

金虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-07 11:35:44
这个soutern确实是不好做 做的不好我们往往是转膜出现问题 抗体的量一般是万分之一你这个探针浓度有点低啊 怎么会只有25ng/ml呢 每微升这么些都不高哇 你说的碱转液是说的是转膜时的缓冲液呢还是胶的变性液啊 转膜 ...

探针经地高辛标记后用试剂盒纯化，浓度是50ng/ul，加到4ul（师兄说的，我一般多加个一两ul）到8ml的杂交液中42度过夜杂交的。碱转液说的转膜的时候的缓冲液，及2M的氯化钠、0.5M的氢氧化钠溶液。
赞一下 回复此楼
做人简单，做事勤奋
13楼2013-06-08 15:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖乐allen

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by dcb005 at 2013-06-07 16:13:04
隐隐约约能看到条带，感觉封闭的不好，还有洗脱，造成大量背景，有条件用p32放射性试一试

有条件可以做，但不敢也不想碰放射性
赞一下 回复此楼
做人简单，做事勤奋
14楼2013-06-08 15:29:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-06-10 16:52:23
引用回帖:
13楼: Originally posted by 肖乐allen at 2013-06-08 15:27:56
探针经地高辛标记后用试剂盒纯化，浓度是50ng/ul，加到4ul（师兄说的，我一般多加个一两ul）到8ml的杂交液中42度过夜杂交的。碱转液说的转膜的时候的缓冲液，及2M的氯化钠、0.5M的氢氧化钠溶液。...

奥 那这个探针浓度是可以的 你这个碱转液的成分怎么跟我们的不一样啊
你说的这个成分怎么跟我们用的变性液成分一样哇 这个变性液是用来浸泡琼脂糖凝胶的 目的是让在琼脂糖凝胶里的基因组变性的 而转膜时的缓冲液是10xSSC 主要成分是柠檬酸钠和氯化钠混合液 是一种中性的高盐溶液
赞一下 回复此楼
15楼2013-06-09 13:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖乐allen

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-09 13:07:09
奥 那这个探针浓度是可以的 你这个碱转液的成分怎么跟我们的不一样啊
你说的这个成分怎么跟我们用的变性液成分一样哇 这个变性液是用来浸泡琼脂糖凝胶的 目的是让在琼脂糖凝胶里的基因组变性的 而转膜时的缓冲液是 ...

厄，不知道。我们做的在转膜之前用稀盐酸浸泡跑好凝胶10分钟，用如上的碱转液转膜。转完膜后用2xSCC中和。
赞一下 回复此楼
做人简单，做事勤奋
16楼2013-06-09 20:40:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 肖乐allen at 2013-06-09 20:40:09
厄，不知道。我们做的在转膜之前用稀盐酸浸泡跑好凝胶10分钟，用如上的碱转液转膜。转完膜后用2xSCC中和。...

我晓得了 我们是转膜前三部处理 包括你说的先用酸再用碱 再用中和液泡 处理完后用10xSSC做转膜液转
赞一下 回复此楼
17楼2013-06-10 12:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖乐allen

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-10 12:31:47
我晓得了 我们是转膜前三部处理 包括你说的先用酸再用碱 再用中和液泡 处理完后用10xSSC做转膜液转...

哦，那咱用的转膜液不同。我们是照着罗氏试剂盒上的啊
赞一下 回复此楼
做人简单，做事勤奋
18楼2013-06-10 21:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lx2825643

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个泳道能看见可能是DNA质量不高，有降解。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

肖乐allen
19楼2013-06-11 15:27:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖乐allen

金虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
19楼: Originally posted by lx2825643 at 2013-06-11 15:27:32
这个泳道能看见可能是DNA质量不高，有降解。

嗯，有可能。我师兄也这么说。但有一个DNA是我最近提的，觉得不太可能降解。
赞一下 回复此楼
做人简单，做事勤奋
20楼2013-06-11 22:57:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 肖乐allen 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-18 11:28 by HjTo14L7GlnE
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-18 10:28 by yS4CkeWDhD6V
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-18 10:18 by yS4CkeWDhD6V
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-18 09:28 by yS4CkeWDhD6V
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +6 kynobel 2026-09-16 7/350 2026-09-18 08:26 by llionlee007
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-18 02:28 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-17 22:29 by cuPZTDXS3VOd
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 4/200 2026-09-17 16:29 by 0ngsZVSCTS7z
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 3/150 2026-09-17 16:03 by 0ngsZVSCTS7z
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-17 05:50 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭