10楼: Originally posted by dcb005 at 2013-06-07 16:13:04
隐隐约约能看到条带，感觉封闭的不好，还有洗脱，造成大量背景，有条件用p32放射性试一试

9楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-07 11:35:44
这个soutern确实是不好做 做的不好我们往往是转膜出现问题 抗体的量一般是万分之一你这个探针浓度有点低啊 怎么会只有25ng/ml呢 每微升这么些都不高哇 你说的碱转液是说的是转膜时的缓冲液呢还是胶的变性液啊 转膜 ...

10楼: Originally posted by dcb005 at 2013-06-07 16:13:04
隐隐约约能看到条带，感觉封闭的不好，还有洗脱，造成大量背景，有条件用p32放射性试一试

13楼: Originally posted by 肖乐allen at 2013-06-08 15:27:56
探针经地高辛标记后用试剂盒纯化，浓度是50ng/ul，加到4ul（师兄说的，我一般多加个一两ul）到8ml的杂交液中42度过夜杂交的。碱转液说的转膜的时候的缓冲液，及2M的氯化钠、0.5M的氢氧化钠溶液。...

15楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-09 13:07:09
奥 那这个探针浓度是可以的 你这个碱转液的成分怎么跟我们的不一样啊
你说的这个成分怎么跟我们用的变性液成分一样哇 这个变性液是用来浸泡琼脂糖凝胶的 目的是让在琼脂糖凝胶里的基因组变性的 而转膜时的缓冲液是 ...

16楼: Originally posted by 肖乐allen at 2013-06-09 20:40:09
厄，不知道。我们做的在转膜之前用稀盐酸浸泡跑好凝胶10分钟，用如上的碱转液转膜。转完膜后用2xSCC中和。...

17楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-10 12:31:47
我晓得了 我们是转膜前三部处理 包括你说的先用酸再用碱 再用中和液泡 处理完后用10xSSC做转膜液转...

19楼: Originally posted by lx2825643 at 2013-06-11 15:27:32
这个泳道能看见可能是DNA质量不高，有降解。