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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

[求助] 关于分子吸光系数和吸光值求浓度的问题,急急急

给出一个分子吸光系数,单位是L/(mol·cm)。另外知道吸光值。怎么计算浓度啊。比如:使用分子吸光系数22000L/(mol·cm)计算羰基含量(nmol/mg MPI)。(一篇文献中的)取的是取1mL质量浓度为2mg/mL的蛋白溶液。吸光值比如说是0.5.怎么计算含量啊?
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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by a皑雪c at 2013-06-22 09:42:51
貌似懂了  应该是先把鱼肉均质,取出部分用TCA沉淀蛋白质再加DNPH反应等等,最后盐酸胍溶解 紫外扫描,367nm值    然后以盐酸胍空白,溶于盐酸胍的蛋白在280nm下测吸光值得出浓度   BSA溶于盐酸胍中得到标准曲线, ...

相差甚远。。。蛋白浓度是用BSA。羰基浓度时测出吸光值然后用摩尔吸光系数去求出来。
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21楼2013-06-22 12:00:03
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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

晕。。。突然明白了。。。
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2楼2013-06-04 22:50:21
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
凯哥要加油: 金币+5, ★有帮助, 虽然你没有回答我大部分问题,好在我已经明白计算过程了。还是谢谢您。 2013-06-05 15:20:58
以蛋白标准溶液浓度(可购买,标准物质稍昂贵)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
计算出回归方程 Y=aX+b
把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L,b的单位为cm时,则 A = abc,比例系数a称为吸收系数,单位为L/g.cm;当c的单位为mol/L,b的单位为cm时,则 A = εbc,比例系数ε称为摩尔吸收系数,单位为L/mol.cm,数值上ε等于a与吸光物质的摩尔质量的乘积。它的物理意义是:当吸光物质的浓度为1 mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性,亦受溶剂和温度的影响。显然,显色反应产物的ε值愈大,基于该显色反应的光度测定法的灵敏度就愈高。
摩尔吸收系数=百分吸收系数*M/10=100*100/10=1000
3楼2013-06-04 22:54:21
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 志子 at 2013-06-04 22:54:21
以蛋白标准溶液浓度(可购买,标准物质稍昂贵)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
计算出回归方程 Y=aX+b
把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓 ...

答案仅代表个人疏学,无权威性,有误恳请指正。
4楼2013-06-04 22:55:29
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