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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

[求助] 关于分子吸光系数和吸光值求浓度的问题,急急急

给出一个分子吸光系数,单位是L/(mol·cm)。另外知道吸光值。怎么计算浓度啊。比如:使用分子吸光系数22000L/(mol·cm)计算羰基含量(nmol/mg MPI)。(一篇文献中的)取的是取1mL质量浓度为2mg/mL的蛋白溶液。吸光值比如说是0.5.怎么计算含量啊?
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等待最痛苦
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煜,莫烦恼

木虫 (著名写手)

虫蛹

【答案】应助回帖

不做标样,也可以算出吸光物质浓度。
只要知道样品浓度,和稀释倍数,以及摩尔消光系数即可。这一般是计算样品中功能基团(如,巯基、羰基等)的方法。 恳请指正!
努力努力,奋斗奋斗!
19楼2013-06-22 11:44:29
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查看全部 21 个回答

凯哥要加油

银虫 (小有名气)

晕。。。突然明白了。。。
等待最痛苦
2楼2013-06-04 22:50:21
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
凯哥要加油: 金币+5, 有帮助, 虽然你没有回答我大部分问题,好在我已经明白计算过程了。还是谢谢您。 2013-06-05 15:20:58
以蛋白标准溶液浓度(可购买,标准物质稍昂贵)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
计算出回归方程 Y=aX+b
把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L,b的单位为cm时,则 A = abc,比例系数a称为吸收系数,单位为L/g.cm;当c的单位为mol/L,b的单位为cm时,则 A = εbc,比例系数ε称为摩尔吸收系数,单位为L/mol.cm,数值上ε等于a与吸光物质的摩尔质量的乘积。它的物理意义是:当吸光物质的浓度为1 mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性,亦受溶剂和温度的影响。显然,显色反应产物的ε值愈大,基于该显色反应的光度测定法的灵敏度就愈高。
摩尔吸收系数=百分吸收系数*M/10=100*100/10=1000
3楼2013-06-04 22:54:21
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 志子 at 2013-06-04 22:54:21
以蛋白标准溶液浓度(可购买,标准物质稍昂贵)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
计算出回归方程 Y=aX+b
把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓 ...

答案仅代表个人疏学,无权威性,有误恳请指正。
4楼2013-06-04 22:55:29
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