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田甜思

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白浓缩

最近在做蛋白表达,因为目的条带的实测值要比理论值偏大很多,所以想做个质谱来鉴定一下分子量,但是我的蛋白样品纯度不高,而且浓度也不高,求各位大虾帮忙解决一下
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-04 12:37:11
要超滤管,浓缩,更具分子量有不同的选择。如果样品可以走个LC/MS我想应该可以分析得到的!
祝好运。
2楼2013-06-04 09:57:54
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zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不行自己做个western也可以啊,还省钱。质谱的话有10ug就可以
3楼2013-06-04 11:39:25
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qianshengguo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

蛋白带标签吗?
有的话,可以过一个亲和层析什么的。
没有的话可以过离子柱或疏水柱。
这样就可以提高蛋白纯度和浓度。还想蛋白浓度再更高些,那可以用超滤管再浓缩一下。
4楼2013-06-08 14:30:35
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

直接用millipore超滤离心管上离心机低温离心浓缩即可。
5楼2013-06-08 16:13:31
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