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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 验证miRNA对靶基因剪切位点的RLM-RACE的效率问题
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chu5700

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-06-07 15:04:35
我用的宝生物的盒子，就是把锚定物TAP用T4 RNA连接酶连到你的mRNA上，注意的是不要进行去帽和磷酸化反应，直接连上之后反转录，之后用内外两层锚定引物和你基因下游的两段特异性引物进行巢式PCR，（设计特异引物的时 ...

你好，我做的两个中，一个有一个剪切位点，在结合处上游40bp,另一个没有剪切位点，不知道怎么回事？能否给下联系方式，谢谢！！
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11楼2015-10-14 19:02:33
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koala0224

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-06-07 15:04:35
我用的宝生物的盒子，就是把锚定物TAP用T4 RNA连接酶连到你的mRNA上，注意的是不要进行去帽和磷酸化反应，直接连上之后反转录，之后用内外两层锚定引物和你基因下游的两段特异性引物进行巢式PCR，（设计特异引物的时 ...

你好，我最近也要做靶基因剪切位点验证，想问一下，你用的宝生物公司的什么盒子啊？能发货号给我吗？锚定物TAP是多长的序列啊？
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12楼2016-05-21 09:34:01
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15817006485

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-06-07 15:04:35
我用的宝生物的盒子，就是把锚定物TAP用T4 RNA连接酶连到你的mRNA上，注意的是不要进行去帽和磷酸化反应，直接连上之后反转录，之后用内外两层锚定引物和你基因下游的两段特异性引物进行巢式PCR，（设计特异引物的时 ...

必须要去除基因组DNA吗，麻烦指点一下，我最近做了好多遍一直失败，第一轮没有条带

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13楼2017-04-23 11:12:10
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延续二代

新虫 (小有名气)
你好，我最近也在做RLM-RACE，我扩增出来的片段大小和预期大小一样，但是测序之后和我的目的基因比对不上，请问是什么原因啊，该如何改进呢？
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14楼2022-04-27 21:51:48
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