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求助Tris-Hcl缓冲液配置问题
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现在提取一物质，完全是参照别人文献做的，就是提不出来，都1个多月了，人都快崩溃了。 现在都开始怀疑自己了。唯一没有check的就是buffer了，现在求助大家。 1. 10 mM的Tris-HCl，pH8.6 因为实验室的 Tris-HCl不是Tris base，就是Tris-HCl，分子量是157.6，所以配置方法入下： 称1.576g 于1000mL 双蒸水中，用6M的NaOH调pH到8.6 2. 100 mM的Tris-HCl，pH8.6 所以配置方法入下： 称15.76g 于1000mL 双蒸水中，用6M的NaOH调pH到8.6 3. 3 mM MgCl2 溶液 因为实验室的是MgCl2.5H2O（分子量203），所以要去除5分子水的含量，配置如下： 称 3.2533g MgCl2.5H2O 于250 mL 双蒸水中。 4. 200 mL buffer ( 3 mM MgCl2 AND 100 mM的Tris-HCl，pH8.6) 配置如下，各取2，3溶液100 mL，混匀，调pH至8.6 [ Last edited by cheng7692 on 2007-10-12 at 08:40 ] |
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5楼2007-10-12 10:34:38
2楼2007-10-12 08:53:35
3楼2007-10-12 09:03:07
reasonspare
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cheng7692(金币+18,VIP+0):谢谢回答
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1. 10 mM的Tris-HCl，pH8.6 因为实验室的 Tris-HCl不是Tris base，就是Tris-HCl，分子量是157.6，所以配置方法入下： 称1.576g 于1000mL 双蒸水中，用6M的NaOH调pH到8.6 2. 100 mM的Tris-HCl，pH8.6 所以配置方法入下： 称15.76g 于1000mL 双蒸水中，用6M的NaOH调pH到8.6 12 没有错，， 3. 3 mM MgCl2 溶液 因为实验室的是MgCl2.5H2O（分子量203），所以要去除5分子水的含量，配置如下： 称 3.2533g MgCl2.5H2O 于250 mL 双蒸水中。 出错了， 你楼主你要得是mole浓度，你知道的， 质量/分子量 就是物质的摩尔浓度。 你为什么无缘无故将结晶水去掉，而人家实际上本身就这样 换句话说：MgCl2.5H2O（分子量203） 称203克是1mol 203-18*5=113 按着楼主的意思，称取 113克 含有5个水的 氯化镁就是1mol。 你可是犯了个低级错误， 你要的是物质量浓度， 你就是将带结晶水放到水里 还是只有 氯化镁，，，，， 楼主再仔细想想，。，， 4、由于三出错，所以这个错了， 还有在4时就不要再调PH了， 多此一举。 哈哈哈哈， 仔细一看，是不是楼主搞错了， 10mM的Tris 是无论如何配不出 100mM的Tris 100ml 的100mM + 100ml 3mM的MgCl2 总浓度 楼主自己算算，哈哈哈 建议如下 先配tris 调好Ph后， 称去定量氯化镁 按物质量浓度算，。，，，，哈哈哈 直接用Tris定容就可以了， 哈哈哈哈， [ Last edited by reasonspare on 2007-10-12 at 09:24 ] |
4楼2007-10-12 09:21:13
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