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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

[求助] DNA提取

提取DNA,琼脂糖检测时,有的DNA被降解掉,有的完全没有,是个什么情况,用的试剂盒
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白翠

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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憨憨可爱多(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-05-29 17:41:51
如果样品不是新鲜的,DNA可能被降解,降解的会显示拖带;如果没有可能是含量比较少,琼脂糖电泳检测不到,可以用核酸检测仪进行检测,看看DNA的浓度。
Thedifferenceinwinningandlosingismostoften...notquitting
2楼2013-05-29 17:35:32
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Ryan2012

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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憨憨可爱多(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-03 18:22:01
你提取的是什么DNA?如果是血液基因组的DNA,可能是由于量很少,同意楼上说的,提完用NaNodrop 测浓度 如果是植物种子的DNA,要看试剂盒的注释部分,认真阅读试剂盒使用说明
3楼2013-05-29 18:45:54
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 白翠 at 2013-05-29 17:35:32
如果样品不是新鲜的,DNA可能被降解,降解的会显示拖带;如果没有可能是含量比较少,琼脂糖电泳检测不到,可以用核酸检测仪进行检测,看看DNA的浓度。

叶片是刚采的,不过DNA浓度时很低了
4楼2013-05-30 15:25:03
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Ryan2012 at 2013-05-29 18:45:54
你提取的是什么DNA?如果是血液基因组的DNA,可能是由于量很少,同意楼上说的,提完用NaNodrop 测浓度 如果是植物种子的DNA,要看试剂盒的注释部分,认真阅读试剂盒使用说明

植物的
5楼2013-05-30 15:25:30
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cyu1987

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


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憨憨可爱多(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-06-03 18:22:09
个人觉得是试剂盒使用上出了问题 比如漂洗液是否加了无水乙醇。建议LZ再核对一下使用说明上的步骤。
6楼2013-05-30 18:05:01
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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那你提的纯度怎么样?
是用的什么盒子啊?
7楼2013-05-31 16:54:06
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cyu1987 at 2013-05-30 18:05:01
个人觉得是试剂盒使用上出了问题 比如漂洗液是否加了无水乙醇。建议LZ再核对一下使用说明上的步骤。

完全按照实际换个要求做的,样品跑琼脂糖差异比较大,有的有,有的又没有
8楼2013-05-31 17:09:27
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangyonghu at 2013-05-31 16:54:06
那你提的纯度怎么样?
是用的什么盒子啊?

北京鼎国,还是有杂质的,琼脂糖检测有的有条带,有的没有,
9楼2013-05-31 17:10:16
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
憨憨可爱多(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-06-03 18:22:19
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-03 23:15:57
用试剂盒不管是抽DNA还是质粒,浓度普遍比较低,但纯度相对来说较高,你这个是植物的基因组,要确保材料要足够多,其次要研磨非常充分,这样量可能多一些。
10楼2013-06-01 18:59:28
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