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开放式郭东杰

木虫 (正式写手)

[交流] PCR问题

为什么跑完胶总是i有很多二聚体    是说明引物浓度过高么？还有marker分不开粉的不好使为什么  谁能解答一下
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1楼 2013-05-28 15:04:43
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songzuowei

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
开放式郭东杰(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-29 02:05:52
gyesang: 回帖置顶 2013-05-29 02:05:54
老是出现异物二聚体的原因有以下几个方面：1，引物设计不好，引物不能很好的与模板配对2，引物浓度过高，需要稀释3，退火温度过低，适当提高退火温度
marker跑不开原因有二：1，胶配的不好，可能溶解不充分，胶成分不均匀2，电泳缓冲液不新鲜，需重新换缓冲液
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7楼2013-05-28 17:52:04
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
开放式郭东杰: 金币+1 2013-05-30 15:22:37
一般是调整退火温度吧
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2楼2013-05-28 15:28:48
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开放式郭东杰

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 静安jingan at 2013-05-28 15:28:48
一般是调整退火温度吧

退火温度挑了很多次   而且跑过梯度   主要最基本的marker分不开这不是有点诡异么
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3楼2013-05-28 15:48:37
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asdry

木虫 (职业作家)
★
开放式郭东杰: 金币+1 2013-05-30 15:22:59
祝楼主诸事顺利，心想事成！
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4楼2013-05-28 16:04:53
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