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wulj513

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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左九年(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-05-29 02:01:30
gyesang: 回帖置顶 2013-05-29 02:01:34
左九年: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-05-29 19:35:15
你这一对引物不是很好。引物一般是18-27个碱基,常用20个碱基;然后就是你的正向引物退火温度太低,一般在45-60度最好;你的上下游引物的Tm值相差比较大,最好相近;你的反向引物GC含量太大了,一般在45%-55%;此外,引物不应有发夹结构,即不能有4bp以上的回文序列;两引物间不应有大于4pb以上的互补序列或同源序列,在3’端不应有任何互补碱基。
有所弃才有所为,有所为才有所不为!
11楼2013-05-28 22:49:39
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wangweijian

金虫 (小有名气)

要是这对引物能P出来,那真是颠覆了所有PCR引物设计原则了。
12楼2014-01-14 15:57:17
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