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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何将生物素biotin连接到核酸如poly(dA:dT)上？
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comeon1216

新虫 (小有名气)

[求助] 如何将生物素biotin连接到核酸如poly(dA:dT)上？

最近想研究一个蛋白是否具有作为DNA sensor的功能，看到许多关于此类分子如DDX41,AIM2等的文献报道，都应用了一个技术即蛋白与DNA 的immunoprecipitation (IP)，即将外源表达的蛋白纯化后与 biotinylated poly(dA:dT)孵育。但是我查到sigma, invivogen等公司卖的都是不带biotin标记的poly(dA:dT)，请问各位同学有什么好方法能够将买到的biotin连接到poly(dA:dT)上吗？顺请附上方法出处。谢谢！
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1楼 2013-05-26 15:11:07
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mxbgene

银虫 (正式写手)
check invitrogen
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http://www.danasoft.com/sig-chi.jpg
2楼2013-05-28 08:17:45
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comeon1216

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mxbgene at 2013-05-28 08:17:45
check invitrogen

谢谢回复。不过我查了，也没有相关的成品或者连接试剂盒。
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3楼2013-05-29 16:10:14
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般的都是把poly(dA:dT)做成带氨基修饰的，因为biotin是带有一个羧基的，然后活化biotin上的羧基，活化好后把他丢进带有氨基修饰的poly(dA:dT)中，反应过夜就OK了，以前我用过一个公司做的一个产品就是做这些交联的，不过没带电脑没法给你找资料，以前我做过的，反应性还是很好的，回去再给你找吧
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4楼2013-05-30 16:21:43
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

最近做一个项目，需要biotin绑一个DNA引物，自己生产我不知道，这个一般是可以找sigma等公司定做的（custom），楼主可以到这里看看http://www.sigmaaldrich.com/chin ... /custom-oligos.html，再打电话问问该公司的技术支持确认一下
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5楼2013-05-30 23:10:30
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comeon1216

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 悠悠落叶 at 2013-05-30 16:21:43
一般的都是把poly(dA:dT)做成带氨基修饰的，因为biotin是带有一个羧基的，然后活化biotin上的羧基，活化好后把他丢进带有氨基修饰的poly(dA:dT)中，反应过夜就OK了，以前我用过一个公司做的一个产品就是做这些交联的 ...

好的.谢谢.坐等.
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6楼2013-06-04 11:54:36
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wyycyq2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主 问题解决了吗？我也需要这个东东，能否分享一下？谢谢！
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7楼2013-11-27 09:55:18
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