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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取的蛋白放置一年后有大团沉淀怎么处理再用它做western blot？谢谢！
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hello_afei

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取的蛋白放置一年后有大团沉淀怎么处理再用它做western blot？谢谢！

Sample Text2012-8-3培养的肺癌细胞种提取的蛋白储存于-20度，今天拿出来室温融化有大团白色沉淀，吹打无法使其融化，请问我把没融化的沉淀洗出弃掉用剩下的溶液做western有影响吗？谢谢！，本人金币不多，多谢了！
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踏歌行
1楼 2013-05-26 00:09:14
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hello_afei(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-26 13:26:52
离心分开沉淀和上清，分别加SDS上样跑胶，WB。蛋白质沉淀没有关系，只要没有被蛋白酶降解，如果有降解，WB时会发现。如果你的抗体特异性好，你可以判断降解产物，如果抗体不好，无法判断变小的蛋白质是杂质还是降解蛋白质。
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2楼2013-05-26 00:33:46
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hello_afei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-26 00:33:46
离心分开沉淀和上清，分别加SDS上样跑胶，WB。蛋白质沉淀没有关系，只要没有被蛋白酶降解，如果有降解，WB时会发现。如果你的抗体特异性好，你可以判断降解产物，如果抗体不好，无法判断变小的蛋白质是杂质还是降解 ...

沉淀加sds怎么上样做wb啊？
赞一下 回复此楼
踏歌行
3楼2013-05-26 16:40:00
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