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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 核酸提取求助:帮忙分析下失败原因在哪?
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yzh-1999

至尊木虫 (著名写手)
哦，看了你的电泳图像，的确没有抽提出DNA ， 前面那些弥散条带可能是RNA，降解的DNA等等。

你说样品不多了？那就更加要小心注意试剂的质量了。 建议重新配制和准备试剂， 消化时间长一些，比如甚至可以将正在消化的样品在37度的摇床上过夜。（不知道别人又没有这样做过，我试过，比较单纯地水浴消化，效果的确有改善。

另外，细心点，即时样品不多，我曾经从个位数的卵中抽提出DNA，细心，乐观点！做实验最需要这两样。
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强则极辱，情深不寿
11楼2007-10-12 16:36:17
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insect2004

银虫 (小有名气)
把样品保存在－80度，保存1－2年不会有问题，如果你们实验室没有超低温冰箱，那你就把样品保存在－20度，保存一两个月应该没有问题。关键试剂重新配，也不费多少事。你现在用的样品都赔了有大半年了，我觉得很有能就是关键试剂的问题。祝顺利！
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12楼2007-10-12 16:37:37
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linkfuture

谢谢楼上2位的热心回复,
你们的意见我会考虑的

现在要理清头绪,逐项排除.....

关键我现在也不知道用哪种提取程序比较合适(不过肯定是微量样品,不知道有哪些改进方法能用,一直在找关于微量样品的提取的文献,收获不大)

有个问题,第一步的碾磨是不是很重要的,

我用螨的若虫和幼虫以及卵(数量都是20)都能提出来DNA
就是换成成虫(也是20只)就不行了,而且成虫的个体要大多了
到底是什么成分导致的失败呢....是不是成虫的身体中有抑制PK的成分或者其他抑制成分存在.
你们有做小型昆虫的么,也有类似的情况出现吗
若虫要比成虫的DNA容易提取

[ Last edited by linkfuture on 2007-10-12 at 18:03 ]
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13楼2007-10-12 18:01:06
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