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前脂肪细胞传代后状态不佳
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大家好，最近我在养前脂肪细胞。将原代细胞传代时，第二天细胞贴得比较多，等2到3天后新的细胞基本能铺满瓶子，于是再进行传代，第二天发现细胞贴壁比较少，这次细胞明显没有第一次传代后细胞长的快，确定细胞没有污染。不知道是什么原因。请大侠帮忙分析一下。以下是几点说明： 1. 方法：加入胰酶消化细胞成单个时，吸走胰酶，加入培养基将细胞冲洗下来，然后分装（1：2），原来的瓶子里的细胞生长稍好一些。 2.传代后首次换液：一般是24小时内换液。 3.第二次传代前，原来的细胞铺满了至少90%，消化，吹打后，接种到新的瓶子，当时明明看到瓶子里有很多圆形的细胞的，但是第二天去看发现贴壁的细胞很少，而且培养基中漂浮的细胞也不多，请问这是怎么回事呢？ 4. 还有一个问题就是，第二次传代后，发现细胞形态发生了一些变化。以前基本都是梭形，传代2次后发现有一些多角形的细胞出现，当然也有少量细胞分化（有小脂滴），难道脂肪细胞不适合大量传代？ 请高手们指点迷津哦，谢谢。 |
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