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前脂肪细胞传代后状态不佳
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大家好,最近我在养前脂肪细胞。将原代细胞传代时,第二天细胞贴得比较多,等2到3天后新的细胞基本能铺满瓶子,于是再进行传代,第二天发现细胞贴壁比较少,这次细胞明显没有第一次传代后细胞长的快,确定细胞没有污染。不知道是什么原因。请大侠帮忙分析一下。以下是几点说明: 1. 方法:加入胰酶消化细胞成单个时,吸走胰酶,加入培养基将细胞冲洗下来,然后分装(1:2),原来的瓶子里的细胞生长稍好一些。 2.传代后首次换液:一般是24小时内换液。 3.第二次传代前,原来的细胞铺满了至少90%,消化,吹打后,接种到新的瓶子,当时明明看到瓶子里有很多圆形的细胞的,但是第二天去看发现贴壁的细胞很少,而且培养基中漂浮的细胞也不多,请问这是怎么回事呢? 4. 还有一个问题就是,第二次传代后,发现细胞形态发生了一些变化。以前基本都是梭形,传代2次后发现有一些多角形的细胞出现,当然也有少量细胞分化(有小脂滴),难道脂肪细胞不适合大量传代? 请高手们指点迷津哦,谢谢。 |
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2013-05-24 22:20
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dingfang0707(金币+1): 谢谢参与
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bwshanxi4楼
2013-05-24 22:49
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2013-05-24 22:50
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dingfang0707(金币+1): 谢谢参与
myprayer: 金币-1, 请勿类似单纯表情回复。。。下不为例,谢谢合作。这种需要求助帮忙的帖子还是多给点实际的可行的意见呀。 2013-05-30 10:26:07
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天涯20127楼
2013-05-24 22:56
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dingfang0707(金币+1): 谢谢参与
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gzl99018楼
2013-05-24 23:20
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2013-05-25 00:18
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clarktao12楼
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