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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 薄层显色原理
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_林风_

金虫 (小有名气)

[求助] 薄层显色原理

有问题一直困惑自己，现总结问题如下，望了解的人详细解答，必有重谢！
   1：G板有必要在254下检测吗？因为只知道GF254板在254下看有暗斑出现，那G板:需要在254下看吗？
  2：在紫外254下和365下检测时，是喷显色剂后呢，还是喷显色剂前呢，因为发现G板喷了香草醛硫酸后在365下看时，斑点显色比较难看，
  3：我的样品用G板后，喷了硫酸乙醇，在254下，365下都能看到斑点，只不过165下颜色更明显，清晰，那么这两个波长显色的原因一样吗
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1楼 2013-05-22 12:45:30
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_林风_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 河边的芦苇 at 2013-05-22 13:09:28
硅胶板的规格分为：G ，H，GF254，HF254。
"硅胶H"-不含粘合剂；"硅胶G"-含煅石膏粘合剂；"硅胶HF254"-含荧光物质，可用于波长为254nm紫外光下观察荧光；"硅胶GF254"-既含 ...

对于你的回答：
1：我的G板254下也有斑点，不观察吗
2：不喷显色剂在254下和365下看斑点不明显，喷后更明显
3:365下不是暗斑啊
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4楼2013-05-22 13:38:06
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河边的芦苇

至尊木虫 (著名写手)

哈氏鹅

【答案】应助回帖

★
_林风_: 金币+1 2013-05-22 16:48:56
引用回帖:
7楼: Originally posted by _林风_ at 2013-05-22 14:51:18
我是想问一下我用G板跑的，254下的有必要看吗？254和365显色条带的原理一样吗...

8楼解释的很全面了，254看暗斑，365看荧光，还有就是为什么喷了硫酸乙醇会显色变深，碳化了呗。（10%浓硫酸-乙醇溶液）
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静于心，睿于智
9楼2013-05-22 15:02:00
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普通回帖

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
_林风_: 金币+1 2013-05-22 13:34:01
薄层色谱TLC(点板)的基本原理。http://wenku.baidu.com/view/031bfcede009581b6bd9eb61.html
薄层层析的原理与操作。http://wenku.baidu.com/view/9ee330110b4e767f5acfceb0.html
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2楼2013-05-22 12:55:47
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河边的芦苇

至尊木虫 (著名写手)

哈氏鹅

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
_林风_: 金币+3, ★有帮助 2013-05-22 13:24:11
硅胶板的规格分为：G ，H，GF254，HF254。
"硅胶H"-不含粘合剂；"硅胶G"-含煅石膏粘合剂；"硅胶HF254"-含荧光物质，可用于波长为254nm紫外光下观察荧光；"硅胶GF254"-既含煅石膏又含荧光剂.
H是Hard的意思
G是glutinous的意思
F是fluorescent的意思

回答你的   问题一：G版就没有荧光的，所以254下观察没有意义的。
               问题二：当然是喷显色剂前了，你喷完显色剂之后会发生碳化、络合等反应，这样在观察就没有意义啦。
               问题三：G版一般使用与在365下看暗斑的·，至于你说的情况不大了解啊
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静于心，睿于智
3楼2013-05-22 13:09:28
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_林风_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 河边的芦苇 at 2013-05-22 13:09:28
硅胶板的规格分为：G ，H，GF254，HF254。
"硅胶H"-不含粘合剂；"硅胶G"-含煅石膏粘合剂；"硅胶HF254"-含荧光物质，可用于波长为254nm紫外光下观察荧光；"硅胶GF254"-既含 ...

254和365下看到的
薄层显色原理
IMG_7285.JPG


薄层显色原理-1
IMG_7288.JPG
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5楼2013-05-22 13:40:19
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河边的芦苇

至尊木虫 (著名写手)

哈氏鹅

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by _林风_ at 2013-05-22 13:40:19
254和365下看到的

IMG_7285.JPG

IMG_7288.JPG
...

楼主您好，我看到你的薄层板了，分离效果不错啊，你是要指导下一步分离么，还是？？？
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静于心，睿于智
6楼2013-05-22 14:29:52
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_林风_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 河边的芦苇 at 2013-05-22 14:29:52
楼主您好，我看到你的薄层板了，分离效果不错啊，你是要指导下一步分离么，还是？？？...

我是想问一下我用G板跑的，254下的有必要看吗？254和365显色条带的原理一样吗
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7楼2013-05-22 14:51:18
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装水的水杯

捐助贵宾 (著名写手)

能把事情做成的人才是牛人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
_林风_: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-22 16:48:40
LZ.我觉得你有一件事情弄混了，254nm下看的是暗斑，365nm下看的是荧光！
暗斑是因为你的样品在254nm下有吸收，所以你的样品所在的位置254nm的光较弱，不会让你的GF254硅胶板发荧光，所以除了绿光你看到你样品的暗斑。
基于此，非GF254的板，在254nm下你是看不出个所以然来的。你真的看出来有东西了，那是因为这个物质在254nm波长激发时是会发荧光的。
365下看的是荧光，因为有很多物质在365nm波长激发时，会发出各种各样的荧光，正如你照片上所示。所以可以作为记录。

为什么喷了硫酸乙醇会显色变深，不太明白。
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一定时时记得自己在做什么
8楼2013-05-22 14:52:38
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_林风_

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 装水的水杯 at 2013-05-22 14:52:38
LZ.我觉得你有一件事情弄混了，254nm下看的是暗斑，365nm下看的是荧光！
暗斑是因为你的样品在254nm下有吸收，所以你的样品所在的位置254nm的光较弱，不会让你的GF254硅胶板发荧光，所以除了绿光你看到你样品的暗斑 ...

好吧，我明白了，谢谢回答
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10楼2013-05-22 16:48:29
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