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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 间充质干细胞向成骨细胞及软骨细胞分化培养基的配置
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zfyzjh

铜虫 (小有名气)

[求助] 间充质干细胞向成骨细胞及软骨细胞分化培养基的配置 已有1人参与

各位大侠大家好，请教一下各位有没有人做过成骨细胞及软骨细胞分化的研究的，不知道成骨诱导培养基及软骨诱导培养基的配方及具体配置方法是怎么样的呢？比如溶解地塞米松，L-脯氨酸等的溶剂应该是什么？然后这些物质溶解后保存在负二十度冰箱，一般可以储存多长时间呢？
另外想请问下，我用24孔板做试验，那么在做MSCs向成骨或者软骨分化的研究时，细胞的初始密度为多大是比较适宜的呢？
非常急切地期待各位的回复，非常感谢！
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1楼 2013-05-19 23:02:58
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妙语1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般的是在MEM－a培养基里加入一定浓度的地塞米松和B－甘油磷酸钠。详细的浓度一般文献里面都有。细胞的话一般长到90%，我一般是等细胞汇聚成片就可以了。
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2楼2013-07-16 21:23:43
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900814

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 妙语1989 at 2013-07-16 21:23:43
一般的是在MEM－a培养基里加入一定浓度的地塞米松和B－甘油磷酸钠。详细的浓度一般文献里面都有。细胞的话一般长到90%，我一般是等细胞汇聚成片就可以了。

可以请问下联系方式么？也是做干细胞骨分化的 学材料的 生物小白 求指导 不胜感激
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3楼2015-10-27 17:42:38
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Frank0917

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据我以前做MSC分化时的经验：
1、地塞米松溶解于无水乙醇，L-脯氨酸应该是溶解于水。保存的话，你分装小份后保存-20度，半年是没问题的。不放心就放-80。
2、成骨、软骨、脂肪分化这三种是有成熟的试剂公司卖成品的，效果比自己配的好。自己配的配方，你搜一下文献，很容易找到。
3、细胞初始密度：你做的两种分化，均需要培养2-3个星期，所以初始密度一般在50%左右即可。建议你根据你所做实验查阅相关文献，或者做一个梯度确定适宜密度。
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不分享心灵鸡汤，只做实实在在的实验管家
4楼2015-10-28 13:34:28
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Frank0917

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 900814 at 2015-10-27 17:42:38
可以请问下联系方式么？也是做干细胞骨分化的 学材料的 生物小白 求指导 不胜感激...

根据我以前做MSC分化时的经验：
1、地塞米松溶解于无水乙醇，L-脯氨酸应该是溶解于水。保存的话，你分装小份后保存-20度，半年是没问题的。不放心就放-80。
2、成骨、软骨、脂肪分化这三种是有成熟的试剂公司卖成品的，效果比自己配的好。自己配的配方，你搜一下文献，很容易找到。
3、细胞初始密度：你做的两种分化，均需要培养2-3个星期，所以初始密度一般在50%左右即可。建议你根据你所做实验查阅相关文献，或者做一个梯度确定适宜密度。
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不分享心灵鸡汤，只做实实在在的实验管家
5楼2015-10-28 13:35:23
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