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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » qPCR出了问题，做实验实在让人不淡定啊
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louisa俊

银虫 (小有名气)

[求助] qPCR出了问题，做实验实在让人不淡定啊

最近做qPCR,一直出现问题！！用的是7500的荧光定量pcr仪器！！居然出现这样的信息提醒！！最终没有扩增曲线出来！

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1楼2013-05-15 16:48:12
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
11楼: Originally posted by louisa俊 at 2013-05-28 23:47:42
首先非常感谢你的帮助，这个黄色圈圈图标要点亮，说明从这里开始读取荧光值？我好像没有点，这是不是我没有扩增曲线的原因呢？？？...

是的，不点的话就没有读取荧光信号，自然没有扩增曲线。熔解曲线那如果你没有改的话应该是点亮的，所以熔解曲线没出问题。
Sybr Green是在延伸时收集扩增曲线的信号，有些荧光探针则是在退火时收集,建议你去学习下不同荧光染料的原理。
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13楼2013-05-29 18:54:57
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love_st

金虫 (著名写手)
★ ★
1949stone: 金币+1, 学习一下 这个会有影响么？ 2013-05-22 08:24:31
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！如何解决这个问题涅？ 2013-05-29 01:58:22
提示你校正数据已经过期
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2楼2013-05-15 16:51:15
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louisa俊

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2013-05-15 16:51:15
提示你校正数据已经过期

那可以忽略这个提示吗？最近做qPCR一直没扩增曲线，但是又溶解曲线。。。也不知道哪个环节出问题
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3楼2013-05-21 15:26:45
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zgb1982

木虫 (正式写手)
你确定延伸步骤加了读取荧光值吗
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4楼2013-05-21 22:06:13
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