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echospig

新虫 (初入文坛)

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[求助] 双向电泳第二向出现了一个很诡异的现象

我用的是GE的Ettan DALTSIX 系统，第一向是3-10的线性胶。以往都是跑13.5%的胶，恒功率25w/GEL。但是今天凌晨跑了一次，还是恒功率25w/GEL，4块胶，我设置的最大电压是300V，最大电流是400MA，功率为12W（3W/GEl）跑了30min.然后是500V，400MA，100W继续跑。以往也是这种设定，大概在2.5-3.0 h就跑完了，但是今天跑了6个小时，溴酚蓝那条线还是很高，而且非常粗，负极端上扬，呈微笑状。最诡异的是感觉胶和玻璃板之间好像有气泡。最后我撤下来了，染色看了一下，图在附件里。只有一半有点，而且有横穿整个胶的横条纹，4块都有。大家帮我看看是什么原因呀？愁死了！水循环也开着，什么都开着，和以前正常的一样，怎么突然会这样呢？求帮助呀！

20130513_101920.jpg

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双向电泳，跑二向的时候，大家的电压或者电流都是怎样设置的啊？？已经有3人回复

1楼 2013-05-13 12:15:44

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DBWJ

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
echospig: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-05-16 20:27:24

引用回帖:

3楼: Originally posted by echospig at 2013-05-13 13:29:52
不应该呀，我的电流还不到100MA，功率也只有10w/GEl。电泳液每天都新配的，这次我还中间重配了一次。关键是我只有一半的胶有点，就像我发那个图一样的。感觉胶和玻璃之间有气泡。这是咋回事呢？...

电泳液Tris-HCl是新配的吗？pH值对不对啊？pH仪器准不准啊？气泡应该没事，是不是电泳槽的电极线没有完全接触电泳液呢？或是上层的电泳液有点渗漏呢？