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echospig

新虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳第二向出现了一个很诡异的现象

我用的是GE的Ettan DALTSIX 系统,第一向是3-10的线性胶。以往都是跑13.5%的胶,恒功率25w/GEL。但是今天凌晨跑了一次,还是恒功率25w/GEL,4块胶,我设置的最大电压是300V,最大电流是400MA,功率为12W(3W/GEl)跑了30min.然后是500V,400MA,100W继续跑。以往也是这种设定,大概在2.5-3.0 h就跑完了,但是今天跑了6个小时,溴酚蓝那条线还是很高,而且非常粗,负极端上扬,呈微笑状。最诡异的是感觉胶和玻璃板之间好像有气泡。最后我撤下来了,染色看了一下,图在附件里。只有一半有点,而且有横穿整个胶的横条纹,4块都有。大家帮我看看是什么原因呀?愁死了!水循环也开着,什么都开着,和以前正常的一样,怎么突然会这样呢?求帮助呀!

20130513_101920.jpg
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DBWJ

金虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
echospig(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-13 12:50:05
微笑状的话应该是电流或功率过大

我跑24cm胶条的时候是2W/胶和15W/胶,电泳液是不是新配的,用时间长的电泳液跑的话时间会变长,最好是每次都新配。
2楼2013-05-13 12:33:25
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echospig

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by DBWJ at 2013-05-13 12:33:25
微笑状的话应该是电流或功率过大

我跑24cm胶条的时候是2W/胶和15W/胶,电泳液是不是新配的,用时间长的电泳液跑的话时间会变长,最好是每次都新配。

不应该呀,我的电流还不到100MA,功率也只有10w/GEl。电泳液每天都新配的,这次我还中间重配了一次。关键是我只有一半的胶有点,就像我发那个图一样的。感觉胶和玻璃之间有气泡。这是咋回事呢?
3楼2013-05-13 13:29:52
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
echospig: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-05-16 20:27:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by echospig at 2013-05-13 13:29:52
不应该呀,我的电流还不到100MA,功率也只有10w/GEl。电泳液每天都新配的,这次我还中间重配了一次。关键是我只有一半的胶有点,就像我发那个图一样的。感觉胶和玻璃之间有气泡。这是咋回事呢?...

电泳液Tris-HCl是新配的吗?pH值对不对啊?pH仪器准不准啊?气泡应该没事,是不是电泳槽的电极线没有完全接触电泳液呢?或是上层的电泳液有点渗漏呢?
4楼2013-05-14 12:07:42
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