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yongleixie金虫 (正式写手)
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FISH图片求助 已有1人参与
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最近在做污水活性污泥中氨氮细菌的FISH，做出的图片感觉不是细菌的发光，哪位大侠帮忙看一下是不是目的细菌发光，还是污泥中的一些自发光或者是其他原因？ 荧光图片.jpg [ 来自科研家族 污水污泥家族 ] |
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【答案】应助回帖
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yongleixie: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-01-02 16:53:23
yongleixie: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-01-02 16:53:23
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一般情况做FISH，你即便要看的是AOB，可能还是要做一个DAPI的染色（荧光显示所有微生物），这样在同一个视野下，根据不同荧光的强度比例，你可以分析在你的样品中，AOB占所有微生物的比重。 这张FISH图片，个人感觉可能有以下几个问题： 1. FISH引物不知道楼主用的是哪个序列，对于AOB的特异性如何，因为个人经验要是使用特异性针对AOB的探针，荧光强度或许没有那么高； 2. 可能是FISH的步骤中未杂交的探针没有有效洗脱，导致结果亮度过高； 3. 视野的选择不是很好，样品可能需要多稀释一下； 4. 显微镜的对焦需要微调一下。 |
2楼2014-01-02 16:24:28
