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xieweijing

金虫 (正式写手)

[求助] T-RFLP分析土壤多样性提取DNA图谱

用OMEGA试剂盒对土壤进行提取DNA,后进行跑胶,再进行PCR检测,用的通用引物27f,1492r,各2ul,模板5ul,supermix25ul,ddh2o16ul,95。5min,95。30s,50。45s,72。1min,35个循环,72.10min。不知道扩增出了没,不太懂,希望大家多指导下,O(∩_∩)O谢谢

提取DNA后分装后合并起来后又跑的胶



PCR后的效果
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好好加油,为自己,也为自己以后!
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672234993

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉是没扩出来,我建议你纯化一下基因组DNA,有时候土壤里面腐植酸等PCR抑制剂太多,会影响扩增的;或者你先试一下将模板稀释10倍,100倍的样子P一下,看看能不能P出来。
延伸时间也是建议90s。
我会回火星去的,别催我。。。。。。
16楼2013-05-19 13:01:46
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