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丫头7976

铜虫 (正式写手)

[求助] superdex 200（GE）的内体积和外体积是多少啊

superdex 200（GE）的内体积和外体积是多少啊?请教各位了
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1楼 2013-05-07 22:06:05
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
丫头7976(小丹木木代发): 金币+2, 鼓励积极应助 2013-05-13 09:12:27
丫头7976: 金币+2, ★★★很有帮助, 嗯，我的膜蛋白才35kDa，但是出峰位置却特别靠前，比420kDa标准蛋白的出峰位置还要早。那看来不能用凝胶过滤来确定蛋白的分子量，进而确定它的功能形态了 2013-05-15 09:41:27
至于内水外水体积，我给你篇GE 柱子信息，你可以自己看得很清楚。
你说的膜蛋白凝胶过滤柱纯化，你的意思是出峰比较靠前？说说我遇到过的，就是同样分子量的蛋白出峰位置相差很大，也没有聚集。后来也没找原因，我自己琢磨着可能是蛋白空间构象的问题，同样分子量的蛋白球形和圆柱形的洗脱位置肯定不同。
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  • 附件 1 : 02GF.pdf
    • 2013-05-13 08:52:16, 2.57 M
3楼2013-05-13 08:52:14
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
丫头7976: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 那内水体积是多少呢 要做标准曲线算Ka值得知道外体积和内体积，还有个问题请教你，我有个膜蛋白，含两个跨膜区，膜蛋白分子量是35kDa，ni柱纯化后，凝胶过滤柱纯化，出峰的体积却比420kDa标准蛋白的体积还小，为什么是这个样子，难道膜蛋白容易聚集吗，估测了一下聚集体大概至少得是八聚体，不太可能吧，这也太复杂了，楼主有经验吗，这是怎么回事 2013-05-11 08:53:21
superdex 200总体积是120ml，外水体积差不多占三分之一。
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2楼2013-05-09 09:10:17
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
丫头7976: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-17 21:24:59
是的，不能通过凝胶来确定蛋白分子量，有条件做质谱，才是最可靠的。
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4楼2013-05-15 12:23:09
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jiao.shi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2013-05-09 09:10:17
superdex 200总体积是120ml，外水体积差不多占三分之一。

我想问一下外水占三分之一是怎么得来的
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5楼2015-04-20 11:36:04
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