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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我没有试过超生这么常见,你可以直接使用细胞裂解液啊!现在商业化的盒子很多,针对细菌,酵母哺乳动物的都可以啊!包涵体是错误折叠的蛋白,所以其应该是没有活性的,所以我想还是你细胞裂解不充分。不能光看你机器操作多久,而应该看看细胞是否破碎,不同质量的仪器起破碎细胞效果都是不一样的。再者可以走个蛋白胶看看,总蛋白,上清,沉淀,最终得出结论,是蛋白释放后没有活性还是蛋白没有被释放还在胞内。
希望对你有用
21楼2013-05-10 10:59:38
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你怎知道蛋白质晶体没有水!?你太孤陋寡闻了吧!去问问任何做晶体的人都会告诉你。

你不是想要文献吧。我告诉你:
Fersht, A. R. (1999) Structure and mechanism in protein science,  W. H. Freeman, New York,这书里怎么写的自己看去!现在该书电子版不在我这里,改日上传!不知道 A.R.Fersht 是谁?自己查去,如果连他都查不出是谁?根本不配与我辩论!!
22楼2013-05-10 13:01:38
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

蛋白质沉淀就一定没有活性?---------搞笑吧!
固定化酶有没有生物学活性??
PrP(scrapie)有没有生物活性??:
参考文献举例:
【荷兰】曹荻秋(Linqiu Cao) 著,杨晟、袁中一 译,载体固定化酶----原理、应用和设计,化学工业出版社,2008;
PrP(scrapie):S.B.Prusiner,Prion Biology and Diseases,Cold Spring Harbor Laboratory Press,2004,Second Edition.
23楼2013-05-10 13:15:04
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

蛋白质沉淀就一定没有活性?---------搞笑吧!
固定化酶有没有生物学活性??
PrP(scrapie)有没有生物活性??:
参考文献举例:
【荷兰】曹荻秋(Linqiu Cao) 著,杨晟、袁中一 译,载体固定化酶----原理、应用和设计,化学工业出版社,2008;
Stanley B.Prusiner,Prion Biology and Diseases,Cold Spring Harbor Laboratory Press,2004,Second Edition.
----------如果淀粉状沉淀的PrP(scrapie)没有生物活性,那么克-雅氏综合征和疯牛病都不存在了!而且如果有人能够证明蛋白质沉淀就一定没有生物活性,那么其足以否定Stanley B.Prusiner的1997年诺贝尔化学奖!!我不知道论坛现在就能有如此大神!!
24楼2013-05-10 13:20:28
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

Fersht, A. R,Structure and mechanism in protein science,  W. H. Freeman, New York,1999,P45:
"In many cases,the crystal retains enzymatic activity.In some cases,the activityof the enzyme in the crystal is the same as that in solution."更多的内容自己看去,有谁能说蛋白质晶体不是蛋白质沉淀的一种??

Fersht, A. R,Structure and mechanism in protein science:a guide to enzyme catalysis and protein folding,W. H. Freeman, New York,1999,下载:
http://ishare.iask.sina.com.cn/f/9767614.html
需要在新浪爱问免费注册后就有20分,然后花掉5分就可下载到该书。文献那书上有的是,再不行,用关键词查CNS。
25楼2013-05-10 14:01:53
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