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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白破碎后，上清的活性很低
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我没有试过超生这么常见，你可以直接使用细胞裂解液啊！现在商业化的盒子很多，针对细菌，酵母哺乳动物的都可以啊！包涵体是错误折叠的蛋白，所以其应该是没有活性的，所以我想还是你细胞裂解不充分。不能光看你机器操作多久，而应该看看细胞是否破碎，不同质量的仪器起破碎细胞效果都是不一样的。再者可以走个蛋白胶看看，总蛋白，上清，沉淀，最终得出结论，是蛋白释放后没有活性还是蛋白没有被释放还在胞内。
希望对你有用
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21楼2013-05-10 10:59:38
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你怎知道蛋白质晶体没有水！？你太孤陋寡闻了吧！去问问任何做晶体的人都会告诉你。

你不是想要文献吧。我告诉你：
Fersht, A. R. (1999) Structure and mechanism in protein science,  W. H. Freeman, New York，这书里怎么写的自己看去！现在该书电子版不在我这里，改日上传！不知道 A.R.Fersht 是谁？自己查去，如果连他都查不出是谁？根本不配与我辩论！！
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22楼2013-05-10 13:01:38
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

蛋白质沉淀就一定没有活性？---------搞笑吧！
固定化酶有没有生物学活性？？
PrP(scrapie)有没有生物活性？？：
参考文献举例：
【荷兰】曹荻秋(Linqiu Cao) 著，杨晟、袁中一 译，载体固定化酶----原理、应用和设计，化学工业出版社，2008；
PrP(scrapie)：S.B.Prusiner,Prion Biology and Diseases,Cold Spring Harbor Laboratory Press,2004,Second Edition.
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23楼2013-05-10 13:15:04
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

蛋白质沉淀就一定没有活性？---------搞笑吧！
固定化酶有没有生物学活性？？
PrP(scrapie)有没有生物活性？？：
参考文献举例：
【荷兰】曹荻秋(Linqiu Cao) 著，杨晟、袁中一 译，载体固定化酶----原理、应用和设计，化学工业出版社，2008；
Stanley B.Prusiner,Prion Biology and Diseases,Cold Spring Harbor Laboratory Press,2004,Second Edition.
----------如果淀粉状沉淀的PrP(scrapie)没有生物活性，那么克-雅氏综合征和疯牛病都不存在了！而且如果有人能够证明蛋白质沉淀就一定没有生物活性，那么其足以否定Stanley B.Prusiner的1997年诺贝尔化学奖！！我不知道论坛现在就能有如此大神！！
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24楼2013-05-10 13:20:28
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
Fersht, A. R，Structure and mechanism in protein science,  W. H. Freeman, New York，1999，P45：
"In many cases,the crystal retains enzymatic activity.In some cases,the activityof the enzyme in the crystal is the same as that in solution."更多的内容自己看去，有谁能说蛋白质晶体不是蛋白质沉淀的一种？？

Fersht, A. R，Structure and mechanism in protein science：a guide to enzyme catalysis and protein folding，W. H. Freeman, New York，1999，下载：
http://ishare.iask.sina.com.cn/f/9767614.html
需要在新浪爱问免费注册后就有20分，然后花掉5分就可下载到该书。文献那书上有的是，再不行，用关键词查CNS。
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25楼2013-05-10 14:01:53
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