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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么质粒DNA加入loading buffer 后会漂样
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晓林寒风

新虫 (初入文坛)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-29 19:00:36
引用回帖:
8楼: Originally posted by 酶切专家 at 2013-05-07 22:50:12
样品中有酒精残留，在洗脱前再高速离心一次，然后室温放置几分钟，让酒精都挥发掉，就没问题了

是因为酒精残留，我也过相同经历，挥发一下酒精就好
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11楼2013-05-08 08:35:08
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roomofxw

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-29 19:01:04
酒精没有挥发完全
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12楼2013-05-08 08:59:27
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-29 19:01:10
酒精没有挥发完全
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你的日子如何，你的力量也必如何！
13楼2013-05-08 09:09:24
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PCR-CL

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
2009107082: 金币+2 2013-05-10 08:46:38
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-29 18:59:41
gyesang: 回帖置顶 2013-05-29 19:00:54
上面的网友把问题点基本都说出来了:
主要是,质粒提取,最后一步乙醇清洗后，乙醇没有挥发净,导致你溶出的质粒中含有醇,电泳时容易漂浮,难沉降.

解决问题方法：
1、若提出的质粒样品很多，可以重新乙醇精制，70%乙醇清洗后，要晾干至没有乙醇的味道，再溶出质粒。
2、电泳时，loading buffe使用量加大。
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14楼2013-05-08 22:55:00
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-29 19:01:17
质粒溶液中有乙醇而已啊

你可以把装质粒的管子55°水浴一下，促进酒精挥发。
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15楼2013-05-09 09:04:48
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Pushing2012

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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我也最近遇到相同的问题
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16楼2013-05-09 10:00:10
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lvanmorison

禁虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
17楼2013-05-09 10:45:55
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乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-29 19:01:35
引用回帖:
7楼: Originally posted by 2009107082 at 2013-05-07 16:00:31
请问，会不会是试剂盒里TE有问题，怎么我用自己配置试剂来提取质粒，跑胶就没有问题。有哪些原因会影响DNA的沉淀啊。。。...

一般可用直接用水 灭菌的了就行
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一花一世界、一叶一菩提
18楼2013-05-28 19:44:13
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