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Grace葡萄

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA提纯后 到底用什么回溶!!??

如题呀 是TE吗?还是dd水?
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sweetbobo

银虫 (小有名气)

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Grace葡萄(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-06 22:28:40
用dd水溶解,-20度保存 半年都没问题
2楼2013-05-06 17:00:28
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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Grace葡萄(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-06 22:28:50
灭菌的dd水溶解,-20度保存 半年都没问题
3楼2013-05-06 17:10:21
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

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Grace葡萄(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2013-05-06 22:28:58
都可以,我们实验室都用
做出色的科研人
4楼2013-05-06 19:23:38
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zhangquan084

木虫 (正式写手)

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★
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Grace葡萄(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-06 22:29:09
最好是dd水,如果你想长期保存的话。
生而不息,奋斗不止!
5楼2013-05-06 19:42:17
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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我见到的是最好保存在TE容易里面
一是因为DNA在高盐溶液中不容易变性,二是TE含有EDTA螯合金属离子防止DNA被DNA酶降解
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2013-05-06 22:30:34
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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Grace葡萄(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-07 00:56:11
纠正一下楼上的观点!在DD水溶解溶解主要是为了方便后续的酶反应,如酶切测序链接等反应,但是DNA在dd水中是不稳定的相对于弱碱性的TE溶液。所以如果你想长期保存得话建议使用TE且TE的洗脱效率会高于水,但是如果后续直接做酶切链接测序等反应建议用dd水(一般加热至65会提高洗脱效率),以免离子强度与pH影响最终的酶反应。
希望对你有帮助。
7楼2013-05-06 23:32:25
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Grace葡萄

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-06 23:32:25
纠正一下楼上的观点!在DD水溶解溶解主要是为了方便后续的酶反应,如酶切测序链接等反应,但是DNA在dd水中是不稳定的相对于弱碱性的TE溶液。所以如果你想长期保存得话建议使用TE且TE的洗脱效率会高于水,但是如果后 ...

我就是想做酶切 之后做southern  以前都是用TE回溶 酶切之后 跑电泳的时候都没有带 不知道是不是用TE回溶的原因 这次打算用dd水回溶
8楼2013-05-07 10:58:51
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fanchuannan

铜虫 (小有名气)

都行吧,不过TE中的EDTA容易影响后续立即进行的实验,看你进行什么实验了,建议还是DD水吧
Tomakeeachdaycount。
9楼2013-05-08 23:15:29
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