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可乐7红茶

银虫 (正式写手)

[求助] 亲和层析法分离多糖

哪位大侠知道亲和层析法分离多糖的时候,如何避免洗脱糖的干扰,做出洗脱曲线?谢谢
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)

2楼2013-05-05 16:17:01
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山水老流氓

银虫 (初入文坛)

用的什么亲和层析柱?糖结合蛋白偶联的柱子吗?如果非要用糖洗脱的话,干扰是不可避免的。可以尝试其他方法洗脱,例如高盐,极端ph,或者SDS等,如果不怕搞坏柱子的话。
3楼2013-05-05 19:34:55
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 山水老流氓 at 2013-05-05 19:34:55
用的什么亲和层析柱?糖结合蛋白偶联的柱子吗?如果非要用糖洗脱的话,干扰是不可避免的。可以尝试其他方法洗脱,例如高盐,极端ph,或者SDS等,如果不怕搞坏柱子的话。

是凝集素亲和层析!用其它方法就怕对柱子有损坏!
4楼2013-05-05 20:03:50
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积跬步达千里

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 可乐7红茶 at 2013-05-05 20:03:50
是凝集素亲和层析!用其它方法就怕对柱子有损坏!...

凝集素是糖蛋白或蛋白质,这样的话用高盐,极端ph,或者SDS等进行洗脱,确实挺怕坏了柱子。
不过确实有文献就用的糖进行洗脱来分离纯化多糖,而且还做出了洗脱曲线,真不知道是怎么做到的。
我也想了解!
5楼2013-05-05 20:25:58
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山水老流氓

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-05-06 08:40:52
可乐7红茶: 金币+6 2013-05-09 08:29:24
引用回帖:
4楼: Originally posted by 可乐7红茶 at 2013-05-05 20:03:50
是凝集素亲和层析!用其它方法就怕对柱子有损坏!...

我也是做凝集素亲和层析的。所以在这方面有点小心得吧,我想在你的实验中,亲和层析的洗脱曲线不是最关键的数据,你的关键数据应该是如何分析洗脱的糖成分,例如使用质谱or NMR鉴定之类的,所以尽管没有好的洗脱曲线(洗脱糖产生的干扰),但是凝集素结合的糖还是会在洗脱峰中,应该对你后续的数据分析影响不会太大。如果你非常看重洗脱曲线,那可以考虑之前的回复。
6楼2013-05-05 21:26:58
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