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遥控器68

金虫 (小有名气)

[求助] 双向第二向拖尾和底部花边,求助

15%胶,TCA/Ace沉淀蛋白。
1. 图1和2都可以看到底部都成花边了,不知是什么问题。胶是均匀的,胶板干净。
2.图2中进入分离胶处有很多颗粒,并且纵向拖尾严重。横向酸性端还有几个点,碱性端都是横拖了,求解释。聚焦不好么,那么为什么有酸性端有点啊?

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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
遥控器68: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-05-30 11:54:11
我感觉你的胶底下还是聚合的有点问题,调整一下AP和TEMED的含量,如果室温高的话就少用一些AP,室温低的话就稍微多用点,聚合不能太快。

进入胶有颗粒可能是你平衡的时候没弄好,平衡时间加DTT和IAA的时间20min就够。

横拖尾是聚焦的事,你样品盐离子应该尽量的除去,还有DTT和IPG的含量不能太多。

还有就是你的ACR/BIS储液,电泳液,都要过一遍滤膜,而且用过滤完的电泳液配封胶液。

暂时就想到这么多了
2楼2013-05-30 09:23:28
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