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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CTAB提DNA时不加疏基乙醇影响大吗？
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聂子3388

铜虫 (小有名气)

[求助] CTAB提DNA时不加疏基乙醇影响大吗？

最近在提DNA，每次加疏基乙醇味道太大，还会头昏。之前看过文献，疏基乙醇是还原剂，可以保护DNA，但有些文献实验方法是加有疏基乙醇，但是有些也是没有的。请问各位虫友们，加与不加影响大吗？不甚感激
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1楼 2013-05-02 10:53:27
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shenyunlong

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

今天刚抽提了一批DNA，发现不加巯基乙醇，酚等对蛋白等杂质去除不干净，最终DNA呈褐色。总之对于幼嫩好提的组织抽提影响不大，但对于较老或杂质较多的组织最好加巯基乙醇。
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14楼2013-10-31 13:13:22
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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聂子3388(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 19:41:47
CTAB法用使用到了酚，好像酚特别容易被氧化，氧化后就无法另蛋白变性，加入巯基乙醇会防止酚被氧化。
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2楼2013-05-02 15:38:43
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shangming

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
聂子3388(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 19:41:54
影响不是很大，CTAB用来多糖和其他污染的大分子，酚抽提用来除变性蛋白质。如果你是提取微生物DNA的，可能是破壁的步骤有问题。
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3楼2013-05-02 16:54:13
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zsewqa129

禁虫 (初入文坛)
★
感谢参与，应助指数 +1
聂子3388(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-03 19:42:03
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4楼2013-05-02 17:05:29
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