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sspc和dgge有什么区别？主要是测试目标方面
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6楼2013-05-03 09:24:14
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
stormxuhao: 金币+2, 积极应助 2013-05-03 09:14:53
疾风掠影: 金币+10 2013-05-03 09:34:08
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DGGE 和SSCP 技术都是基于相同长度不同碱基序列的DNA 片段在电场中电泳迁移率不同而进行分离, 但两者形成电泳迁移率差异的原理不同。前者是双链DNA 分子在含梯度变性剂的聚丙烯酰胺凝胶中变性, 从而发生空间构型的变化;后者则是单链DNA 分子在非变性的聚丙烯酰胺凝胶中, 通过内部碱基配对形成不同的空间构象。DGGE 由于 GC 夹的特殊作用, 需要使用较长的PCR 引物, 加之PCR 产物中的异源双链DNA 分子, 在DGGE 图谱中可能会产生一些“假”条带; 而SSCP 则不受这两种因素的影响. 前者所需要的仪器比较简单也不贵,后者需要专门的电泳仪.效果上差不多,操作时,前者需要聚然降温,引物要磷酸化;后者引物要设计GC夹子.反正都比较麻烦,DGGE是一种健全地方法，一旦优选一个产物，他将很有效。结果也很容易检测出来，因为只要放在紫外灯下一看就能立刻看到突变。清晰的结果是DGGE的一个巨大的优点。另外一个优点是它不需要放射性标记。SSCP需要放射性PCR或者银染，并且结果不够清晰。另一方面，SSCP比DGGE需要的时间少，并且不需要昂贵的材料。这就是为什么大量的样本用这种方法的原因。例如，筛选少量的样本要求用SSCP。DGGE适合于少选大量的长周期的样本 |
5楼2013-05-03 08:53:51