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关于夹心法Elisa测目的蛋白含量时发现的诡异标准曲线
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情况如下： 我用Elisa测目的蛋白的含量，酶标仪的最大量程为4. 利用AP藕联的2抗进行检测，pNPP为底物，夹心法Elsia，每次均有阴性对照和空白，每次阴性对照和空白的值均为0.1左右，没有高于0.2的。 我做了4次Elisa，每次的R2均达到了0.99，但是每次的计算公式均不相同，分别为 y=5.408x-0.598 y=2.503x-0.223 y=1.22x-0.114 但是样品的吸光值大都为2.0~3.0之间，这就出现了一个问题，相同的样品，在几次实验中测的的含量差别很大，达到了几倍。 这不科学啊，实在想不出来是啥原因了，希望大家能帮帮我，眼瞅明年要毕业了，还卡在这呢，拜托了。 2.7059 1.16615 0.47035 0.2509 0.17125 0.15265 0.142 5 1.5 0.5 0.166 0.056 0.0185 0.002 1.929 0.63045 0.29255 0.18095 0.1485 0.15065 0.13745 5 1.5 0.5 0.166 0.056 0.0185 0.002 1.4479 0.6022 0.3976 0.3207 0.30315 0.28825 0.27875 5 1.5 0.5 0.166 0.056 0.0185 0.002 这是3次的结果，上层是OD，下层是浓度。用OD和浓度在Excel里做线性拟合，R2还是可以的。就是不知道为什么在公式有变化的同时，样品的OD值波动却不大？？？ |
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