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小鼠B16黑素瘤细胞的培养问题
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| 大家好，我培养的小鼠B16黑素瘤细胞在传到第四代时培养液出现浑浊，并且细胞出现死亡和细胞融合。请问是这什么原因？污染了会不会引起上述现象？ |
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你好，谢谢你的帮助，你养了3年的B16应该是很有经验的。我是才开始养B16的，我还是有些问题不是很明白，想请教你，请帮帮忙了，呵呵呵谢谢。我从细胞库买来细胞就开始养。说明书上说3天传一代，结果长的太好了养了半天就铺满了，（怎么细胞会长的这么快啊？）就开始冻存和传代。第二代和第三代长势都很快，但是随着代数的增加培养周期也开始延长了，（这是什么原因啊？）期间培养液也是浑浊的，当培养液很浑浊时我换过培养液（这个操作应该不会有影响吧？）。但是到了第四代观察细胞的时候就发现培养液浑浊并且有黑色的小点，而且小黑点还有簇状的单个的还会动，有的高速旋转（这个应该是属于污染了吧？）。倒掉污染这几瓶细胞后我又复苏了一管第二代冻存的细胞培养，刚开始都是好好的，换过几次培养液后培养液中又出现小黑点了（冻存的第二代应该没有污染）。 还有请教一下，我用的是试剂公司生产的袋装的培养干粉，这应该是属于高糖的吧？袋装的干粉配方也没有标注的。我见培养条件是要高糖的培养基。 请帮我解答一下，非常感谢。。。 |
3楼2013-05-05 12:21:16
2楼2013-05-04 23:31:12
4楼2013-05-06 16:11:16
呵呵呵。 5楼2013-05-06 23:24:35