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小兵仔

新虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠B16黑素瘤细胞的培养问题

大家好,我培养的小鼠B16黑素瘤细胞在传到第四代时培养液出现浑浊,并且细胞出现死亡和细胞融合。请问是这什么原因?污染了会不会引起上述现象?
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fionaliu1982

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小兵仔: 金币+5, ★★★很有帮助, 有可能是衰老的原因。 2013-05-05 11:39:49
读研时我也养过三年B16细胞,总体来说还是比较好养的。出现死亡等异常情况的原因很多,不一定是污染,也有可能是你的细胞株本身已经老化了。你可以尝试一下以下做法:①换培养液时留一半原液,换一半液;②换用更好的胎牛血清。另外,需要注意的是:传代的时机要把握好,还有酶消化时不要过头。这都是导致损伤老化的原因。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-05-04 23:31:12
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fionaliu1982

铁虫 (初入文坛)

请教谈不上,近点绵薄之力,知道做实验不容易啊!
说明书所说的传代时间不准的,与你传代的量有关的。刚刚半天就铺满了,说明你传的太多了。短期内多次被酶消化,更容易损伤细胞。
培养液我们以前用的是高糖的,这个在配好使用前要试验有无污染。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-05-06 16:11:16
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