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海之子211

新虫 (小有名气)

[求助] 凝胶电泳 DNA mark 没出来,加样孔处亮

跑琼脂糖凝胶电泳,加样孔附近很亮,没有加样的也很亮。左边第一条带是DNA  mark  没有跑出来。琼脂糖浓度为1%,核酸染料gold view

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海之子211

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-30 11:43:58
怀疑核酸染料加得有问题。此外,电泳时的电压、电流是否正常?

电压设置在80,电流60左右。电压应该影响不大吧
4楼2013-04-30 12:14:27
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海之子211

新虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-04-30 12:00:50
没见过这种情况,不过看这胶,感觉染色液的问题,LZ以前跑过电泳吧,建议你回头检查下,药品或者缓冲液都对不对。

缓冲液按照宝生物后面的方子,把NA2EDTA按照分子量换成EDTA。其他应该没什么问题
5楼2013-04-30 12:18:00
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海之子211

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6楼: Originally posted by 馨沁 at 2013-04-30 18:13:27
检查一下buffer,用3微升buffer混合3微升样试试觉得是沉降不好

样品的浓度太高?  明天会试试,还有其他建议?
7楼2013-04-30 20:50:55
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8楼: Originally posted by 扣扣最牛 at 2013-05-01 14:30:51
检查下电泳液、电压电流是否正确 点样孔的亮应该是蛋白类杂志 有机溶剂萃取是否彻底

之前电压是80,现在调到电压100.电流80.   电泳液如何检查,这是自己配的,这可能是个原因。我在网上看的最多的答案就是蛋白杂质,但是我一直不明白  没上样的孔也亮。蛋白在紫外光下会发光?这个问题我也不清楚。不过你的回答对我很有帮助  明天再重提一下。
9楼2013-05-02 08:40:56
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6楼: Originally posted by 馨沁 at 2013-04-30 18:13:27
检查一下buffer,用3微升buffer混合3微升样试试觉得是沉降不好

试了  效果不好
10楼2013-05-02 08:41:17
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11楼: Originally posted by 馨沁 at 2013-05-04 20:10:08
用的是哪家的试剂啊,全试金的和宝生物应该可以。marker是2千的吗

原来缓冲液是自己配的,买现成效果好点。但是没有达到预期效果
12楼2013-05-07 10:20:37
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