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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 凝胶电泳 DNA mark 没出来，加样孔处亮
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海之子211

新虫 (小有名气)

[求助] 凝胶电泳 DNA mark 没出来，加样孔处亮

跑琼脂糖凝胶电泳，加样孔附近很亮，没有加样的也很亮。左边第一条带是DNA  mark  没有跑出来。琼脂糖浓度为1%，核酸染料gold view

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1楼 2013-04-30 11:35:37
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海之子211: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-30 12:15:12
怀疑核酸染料加得有问题。此外，电泳时的电压、电流是否正常？
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2楼2013-04-30 11:43:58
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海之子211: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-30 12:15:42
没见过这种情况，不过看这胶，感觉染色液的问题，LZ以前跑过电泳吧，建议你回头检查下，药品或者缓冲液都对不对。
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戒掉安逸 多逼逼自己
3楼2013-04-30 12:00:50
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海之子211

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-30 11:43:58
怀疑核酸染料加得有问题。此外，电泳时的电压、电流是否正常？

电压设置在80，电流60左右。电压应该影响不大吧
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4楼2013-04-30 12:14:27
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海之子211

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-04-30 12:00:50
没见过这种情况，不过看这胶，感觉染色液的问题，LZ以前跑过电泳吧，建议你回头检查下，药品或者缓冲液都对不对。

缓冲液按照宝生物后面的方子，把NA2EDTA按照分子量换成EDTA。其他应该没什么问题
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5楼2013-04-30 12:18:00
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馨沁

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海之子211: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-30 20:49:21
检查一下buffer，用3微升buffer混合3微升样试试觉得是沉降不好
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6楼2013-04-30 18:13:27
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海之子211

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 馨沁 at 2013-04-30 18:13:27
检查一下buffer，用3微升buffer混合3微升样试试觉得是沉降不好

样品的浓度太高？  明天会试试，还有其他建议？
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7楼2013-04-30 20:50:55
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扣扣最牛

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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海之子211: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2013-05-02 08:34:05
检查下电泳液、电压电流是否正确 点样孔的亮应该是蛋白类杂志 有机溶剂萃取是否彻底
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梅花香自苦寒来
8楼2013-05-01 14:30:51
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海之子211

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 扣扣最牛 at 2013-05-01 14:30:51
检查下电泳液、电压电流是否正确 点样孔的亮应该是蛋白类杂志 有机溶剂萃取是否彻底

之前电压是80，现在调到电压100.电流80.   电泳液如何检查，这是自己配的，这可能是个原因。我在网上看的最多的答案就是蛋白杂质，但是我一直不明白  没上样的孔也亮。蛋白在紫外光下会发光？这个问题我也不清楚。不过你的回答对我很有帮助  明天再重提一下。
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9楼2013-05-02 08:40:56
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海之子211

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 馨沁 at 2013-04-30 18:13:27
检查一下buffer，用3微升buffer混合3微升样试试觉得是沉降不好

试了  效果不好
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10楼2013-05-02 08:41:17
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