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snowhite1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 抗植物病原真菌的细菌胞外活性物质分离

本人小菜鸟一枚,刚分离到一株有抑制稻瘟病菌的细菌,接下来想分离其活性物质,看过一些论文,有先盐析,然后做层析神马的,可我还是不太知道怎么做,有没有高手请教下,最好有具体的方法步骤奥~
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snowhite1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jpp9898 at 2013-04-30 14:11:21
我猜你是做细菌的活性成分的,这个还是比较难做的,而且变化的情况比较多,你可以看到不管是中文还是英文文献,上面分到的物质很大的一部分是脂肽类的,或是蛋白质的,分离非常困难,而且确定结构也很复杂,需要实验 ...

哎,那我也要继续做呀,谁让我已经选择做这个了,问题是我不知道接下来要怎么做呐
7楼2013-05-09 17:23:41
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangxingc: 金币+1, 欢迎常到微生物版 2013-04-28 10:00:09
snowhite1990: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-16 09:08:40
了解抑菌物质的性质么?给LZ一条路~~~先做酸碱沉淀,没有沉淀下来的话,再实验有机萃取,盐析也是一种办法,不过只是针对蛋白类物质的,LZ也可以实验下。层析是后续纯化的工作了。没有具体点的性质 ,不可能给出你具体步骤的
戒掉安逸 多逼逼自己
2楼2013-04-28 09:14:42
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snowhite1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-04-28 09:14:42
了解抑菌物质的性质么?给LZ一条路~~~先做酸碱沉淀,没有沉淀下来的话,再实验有机萃取,盐析也是一种办法,不过只是针对蛋白类物质的,LZ也可以实验下。层析是后续纯化的工作了。没有具体点的性质 ,不可能给出你具 ...

谢谢您的回答,那么假如我大胆假设其是蛋白质呢,后续纯化该怎么做呢?
3楼2013-04-28 13:49:40
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by snowhite1990 at 2013-04-28 13:49:40
谢谢您的回答,那么假如我大胆假设其是蛋白质呢,后续纯化该怎么做呢?...

那就好办了~~首先确定最好的硫酸铵沉淀浓度,沉淀下来以后用透析除去硫酸铵,然后用分子筛层析,柱子你可以选个合适大小的,试过就知道了,分子筛以后你摸索下它的等电点,是蛋白总会有的,然后用离子吸附层析进一步纯化,浓缩管浓缩一下,跑SDS-page电泳了解它的大小、、、需要做很久的~~许多条件都需要慢慢摸索的
戒掉安逸 多逼逼自己
4楼2013-04-28 15:20:20
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